目的:观察PPARα激动剂非诺贝特对牛主动脉(BAECs)内皮细胞一氧化氮合酶(eNOS)活性和表达的影响.方法:制备5-9代BAECs,加入不同浓度的非诺贝特(0,5,10,50,100μmol/L)后,用NOS Assay Kit测定eNOS活性,RT-PCR法检测eNOS mRNA表达,Western blot分析检测eNOS蛋白质表达.结果:非诺贝特以浓度和时间依赖的方式增加eNOS活性,非诺贝特浓度10 μmol/L以上时,明显增加eNOS活性.50μmol/L非诺贝特处理48h时eNOS活性最大(为对照组的2.32±0.47倍,P<0.01).非诺贝特处理1 h和12 h不增加eNOS活性.RT-PCR分析表明,非诺贝特浓度大于5μmol/L以上时,明显增加eNOS mRNA水平,在非诺贝特浓度为50μmol/L时作用最大,为对照组的2.08±0.33倍(P<0.01).此作用在6 h时出现,持续到48h.Western blot显示,非诺贝特处理48h,eNOS蛋白表达明显增加,在浓度为10,50和100μmol/L时,eNOS蛋白表达分别为对照组的1.80±0.45,2.70±0.42和2.20±0.32倍,均P<0.01.在非诺贝特处理12 h后出现,持续到48h.结论:PPARα激动剂非诺贝特增加BAECs eNOS基因表达,提高eNOS活性及增加蛋白表达.
作者:刘世明;陈敏生;丁月霞;李昭骥
来源:中国病理生理杂志 2004 年 20卷 9期