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目的:鉴定调控L-plastin在非激素依赖型前列腺癌中表达的转录因子,进一步阐明非激素依赖型前列腺癌的发病机理.方法:在鉴定L-plastin启动子近3'端-216到1序列片段存在明显的转录活性的基础上,利用TF SEARCH软件分析该片段的序列,寻找调控L-plastin表达的非甾体激素类转录因子,并用凝胶滞后实验和超滞后实验证实结合于该片段的转录因子,利用PCR定点突变法构建删除该转录因子结合位点的重组子,并检测切除该片段序列后荧光素酶活性变化.结果:TF SEARCH软件分析表明在距转录起始点-54--41 bp处含有SP-1转录因子结合位点GGTGGGGCGGGGA,凝胶滞后实验和超滞后实验表明SP-1是结合于L-plastin启动子3'端该序列的转录因子,删除SP-1结合位点后荧光素酶活性下降.结论:SP-1是促进L-plastin在非激素依赖型前列腺癌中表达的重要调控因子.

作者:林天歆;黄健;尹心宝;许可慰;叶枫;李泗耀;黄海;江春

来源:中国病理生理杂志 2006 年 22卷 7期

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作者:
林天歆;黄健;尹心宝;许可慰;叶枫;李泗耀;黄海;江春
来源:
中国病理生理杂志 2006 年 22卷 7期
标签:
前列腺肿瘤 L-plastin 启动子 转录因子,Sp1
目的:鉴定调控L-plastin在非激素依赖型前列腺癌中表达的转录因子,进一步阐明非激素依赖型前列腺癌的发病机理.方法:在鉴定L-plastin启动子近3'端-216到1序列片段存在明显的转录活性的基础上,利用TF SEARCH软件分析该片段的序列,寻找调控L-plastin表达的非甾体激素类转录因子,并用凝胶滞后实验和超滞后实验证实结合于该片段的转录因子,利用PCR定点突变法构建删除该转录因子结合位点的重组子,并检测切除该片段序列后荧光素酶活性变化.结果:TF SEARCH软件分析表明在距转录起始点-54--41 bp处含有SP-1转录因子结合位点GGTGGGGCGGGGA,凝胶滞后实验和超滞后实验表明SP-1是结合于L-plastin启动子3'端该序列的转录因子,删除SP-1结合位点后荧光素酶活性下降.结论:SP-1是促进L-plastin在非激素依赖型前列腺癌中表达的重要调控因子.