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目的:探讨核因子-κB(NF-κB)对TNF-α诱导的大鼠气道平滑肌细胞(ASMCs)增殖、凋亡和转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响.方法:体外培养ASMCs,以肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及NF-κB特异性抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)作为工具药, 将ASMCs分为对照组、TNF-α组和TNF-α+PDTC组.逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测TGF-β1 mRNA表达,Western blotting检测NF-κB、TGF-β1的表达,免疫细胞化学染色法检测PCNA、Bcl-2蛋白表达及定位,四甲基偶氮唑蓝(MTT)微量比色法测定ASMCs增殖,Annexin V/PI双标记流式细胞仪分析法检测细胞凋亡.结果:(1)TNF-α组ASMCs的NF-κB活性显著高于对照组(P<0.01), TNF-α+PDTC组NF-κB活性显著低于TNF-α组 (P<0.01).(2)TNF-α组ASMCs增殖显著高于对照组(P<0.01), TNF-α+PDTC组的增殖反应显著低于TNF-α组(P<0.01);TNF-α+PDTC组细胞凋亡率显著高于TNF-α组及对照组(P<0.01).(3)TNF-α组ASMCs的PCNA、Bcl-2蛋白表达量均显著高于对照组(P<0.01),TNF-α+PDTC组的PCNA、Bcl-2蛋白表达量均显著低于TNF-α组(P<0.01).(4)TNF-α组ASMCs的TGF-β1的mRNA及蛋白表达水平均显著高于对照组及TNF-α+PDTC组(P<0.01).结论:NF-κB活化可能参与调控TNF-α诱导的大鼠气道平滑肌细胞的增殖

作者:莫碧文;张珍祥;徐永健;王昌明;熊维宁;刘先胜;房春生

来源:中国病理生理杂志 2007 年 23卷 9期

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作者:
莫碧文;张珍祥;徐永健;王昌明;熊维宁;刘先胜;房春生
来源:
中国病理生理杂志 2007 年 23卷 9期
标签:
气道平滑肌细胞 NF-κB 细胞增殖 细胞凋亡 转化生长因子β
目的:探讨核因子-κB(NF-κB)对TNF-α诱导的大鼠气道平滑肌细胞(ASMCs)增殖、凋亡和转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响.方法:体外培养ASMCs,以肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及NF-κB特异性抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)作为工具药, 将ASMCs分为对照组、TNF-α组和TNF-α+PDTC组.逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测TGF-β1 mRNA表达,Western blotting检测NF-κB、TGF-β1的表达,免疫细胞化学染色法检测PCNA、Bcl-2蛋白表达及定位,四甲基偶氮唑蓝(MTT)微量比色法测定ASMCs增殖,Annexin V/PI双标记流式细胞仪分析法检测细胞凋亡.结果:(1)TNF-α组ASMCs的NF-κB活性显著高于对照组(P<0.01), TNF-α+PDTC组NF-κB活性显著低于TNF-α组 (P<0.01).(2)TNF-α组ASMCs增殖显著高于对照组(P<0.01), TNF-α+PDTC组的增殖反应显著低于TNF-α组(P<0.01);TNF-α+PDTC组细胞凋亡率显著高于TNF-α组及对照组(P<0.01).(3)TNF-α组ASMCs的PCNA、Bcl-2蛋白表达量均显著高于对照组(P<0.01),TNF-α+PDTC组的PCNA、Bcl-2蛋白表达量均显著低于TNF-α组(P<0.01).(4)TNF-α组ASMCs的TGF-β1的mRNA及蛋白表达水平均显著高于对照组及TNF-α+PDTC组(P<0.01).结论:NF-κB活化可能参与调控TNF-α诱导的大鼠气道平滑肌细胞的增殖