目的:构建携带小鼠脂联素(Acrp30)siRNA腺病毒载体,并检测其对小鼠脂肪细胞Acrp30表达以及对3T3-L1脂肪细胞基础葡萄糖转运的影响.方法:设计并化学合成小鼠脂肪细胞Aerp30 siRNA片段,将其亚克隆入AdEaxy XL腺病毒载体系统,在293细胞内包装扩增为重组腺病毒.用此重组腺病毒感染3T3-L1脂肪细胞,用RT-PER和ELISA检测其Acrp30 mRNA和蛋白表达.采用2-Deoxy-[3H]D-glucose掺入法测定脂肪细胞葡萄糖转运.结果:设计并构建了小鼠Acrp30基因特异性siRNA腺病毒载体,该载体感染脂肪细胞后,能显著抑制Acrp30 mRNA和蛋白表达,影响3T3-L1脂肪细胞基础葡萄糖的转运,与对照组相比,差异显著(P<0.05).结论:构建的Aerp30基因特异性siRNA腺病毒载体能有效地抑制脂联素在3T3-L1脂肪细胞中的表达,从而影响3T3-L1脂肪细胞基础葡萄糖转运.
作者:孟凡萍;王长本;李良琼;郝坡
来源:中国病理生理杂志 2008 年 24卷 11期