目的 利用小鼠盐诱导基因(Salt induced kinase2,SIK2)的重组腺病毒载体,研究脂肪细胞中SIK2的表达.方法 重组小鼠SIK2基因腺病毒载体经脂质体转染293A细胞,在细胞内包装获得腺病毒颗粒AdV-SIK2,并进行大量扩增和纯化.纯化的腺病毒感染成熟的3T3-L1脂肪细胞,通过real-time PER及免疫印迹法检测鼠SIK2在3T3-L1脂肪细胞中的表达.结果 纯化后的病毒滴度达0.5×1012病毒颗粒/ml.重组腺病毒载体能在成熟3T3-L1脂肪细胞中高表达鼠SIK2 mRNA和SIK2蛋白.结论 重组腺病毒载体可介导外源小鼠SIK2基因在脂肪细胞的表达,建立了小鼠SIK2高表达脂肪细胞模型,为进一步研究SIK2的脂代谢功能奠定了基础.
作者:杜静;周钧;周薇;陆红;宴耀明;邹德学
来源:中国实验诊断学 2008 年 12卷 11期