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目的: 探讨体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)向神经元样细胞分化过程中凋亡发生的机制.方法:分离纯化大鼠骨髓间充质干细胞,随机分为3组:对照组为单纯β-巯基乙醇诱导分化组;NEK1/2抑制剂1,4-二氨基-2,3-氰基-1,4-双[2-氨基苯基硫代]丁二烯(U0126)组为自预诱导开始在加入β-巯基乙醇的同时加入10 μmol/L U0126;蛋白激酶PKC激动剂氟波酯(PMA)组为自预诱导开始在加入β-巯基乙醇的同时分别加入30 nmol/L、120 nmol/L与300 nmol/L PMA.诱导5 h后终止反应,MTT法检测细胞活性,免疫细胞化学检测神经元特异性巢蛋白nestin及凋亡相关蛋白caspase、Bcl-2、Bax的表达情况,TUNEL法检测细胞凋亡指数.结果: 诱导后5 h与对照组相比,U0126组神经元样细胞的活性、nestin的表达、Bcl-2蛋白阳性表达率均出现增强或升高(P<0.05),细胞凋亡指数降低(P<0.05);300 nmol/L PMA组则显著抑制神经元样细胞的活性和nestin的表达(P<0.05),增强Bax并降低Bcl-2的表达(P<0.05),细胞凋亡指数明显升高(P<0.05).结论: 大鼠MSCs诱导分化为神经元样细胞过程中发生凋亡机制涉及MAPK及PKC信号途径.

作者:何涛;王丽;刘哓燕;冯宁;李娟

来源:中国病理生理杂志 2009 年 25卷 10期

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作者:
何涛;王丽;刘哓燕;冯宁;李娟
来源:
中国病理生理杂志 2009 年 25卷 10期
标签:
骨髓间充质干细胞 神经元 细胞凋亡 信号转导
目的: 探讨体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)向神经元样细胞分化过程中凋亡发生的机制.方法:分离纯化大鼠骨髓间充质干细胞,随机分为3组:对照组为单纯β-巯基乙醇诱导分化组;NEK1/2抑制剂1,4-二氨基-2,3-氰基-1,4-双[2-氨基苯基硫代]丁二烯(U0126)组为自预诱导开始在加入β-巯基乙醇的同时加入10 μmol/L U0126;蛋白激酶PKC激动剂氟波酯(PMA)组为自预诱导开始在加入β-巯基乙醇的同时分别加入30 nmol/L、120 nmol/L与300 nmol/L PMA.诱导5 h后终止反应,MTT法检测细胞活性,免疫细胞化学检测神经元特异性巢蛋白nestin及凋亡相关蛋白caspase、Bcl-2、Bax的表达情况,TUNEL法检测细胞凋亡指数.结果: 诱导后5 h与对照组相比,U0126组神经元样细胞的活性、nestin的表达、Bcl-2蛋白阳性表达率均出现增强或升高(P<0.05),细胞凋亡指数降低(P<0.05);300 nmol/L PMA组则显著抑制神经元样细胞的活性和nestin的表达(P<0.05),增强Bax并降低Bcl-2的表达(P<0.05),细胞凋亡指数明显升高(P<0.05).结论: 大鼠MSCs诱导分化为神经元样细胞过程中发生凋亡机制涉及MAPK及PKC信号途径.