目的:将构建成功的真核表达载体pEGFP-BMI-1转染宫颈癌细胞系HeLa,检测其对同源盒(HOX)基因表达和细胞周期的影响.方法: 采用脂质体转染法,将质粒pEGFP-BMI-1 DNA瞬时转染HeLa细胞,确定融合蛋白B细胞特异性莫洛尼氏白血病毒插入位点1-加强型绿色荧光蛋白(BMI-1-EGFP)表达后,实时荧光定量RT-PCR方法检测转染前后HeLa细胞中周期素依赖性激酶抑制剂P16~(INK4a)、人类端粒酶逆转录酶(hTERT)、同源盒A9(HOXA9)、同源盒B4(HOXB4)和同源盒C13(HOXC13) mRNA的表达变化,PI染色流式细胞仪检测细胞周期.结果: (1)在HeLa细胞中过表达BMI-1显著下调P16~(INK4a)、HOXA9和HOXC13 mRNA的表达,分别平均降低为对照组的9.2
作者:陈凤花;李一荣;王琳;胡丽华
来源:中国病理生理杂志 2009 年 25卷 12期