目的:研究不同剂量肿瘤坏死因子-α (TNF-α)对肺微血管内皮细胞NF-E2相关因子2 (Nrf2) 转录调节活性的影响.方法:肺组织块贴壁法培养大鼠肺微血管内皮细胞,Ⅷ因子相关抗原间接免疫荧光鉴定所培养的细胞.采用含有0 μg/L、2.5 μg/L、5 μg/L、10 μg/L 、20 μg/L和40 μg/L TNF-α的无血清培养基处理肺微血管内皮细胞4 h后,以免疫细胞化学技术观察细胞内Nrf2的亚定位及含量的变化;提取细胞核蛋白和总RNA,以变动迁移率分析技术检测Nrf2转录调节活性的变化以及采用RT-PCR技术检测细胞Nrf2 mRNA表达水平的变化.结果:采用 2.5、5.0、10.0 μg/L TNF-α处理细胞,核内Nrf2水平和Nrf2转录调节活性随浓度的增加而呈现上升趋势;而采用20.0 μg/L、40.0 μg/L TNF-α处理细胞,核内Nrf2水平及其转录调节活性有所下降;不同剂量TNF-α对细胞Nrf2基因转录水平没有明显影响.结论:不同剂量TNF-α对肺微血管内皮细胞Nrf2转录调节活性产生不同影响:中、低剂量TNF-α增强Nrf2转录调节活性,而大剂量TNF-α引起Nrf2转录调节活性下降.
作者：甯交琳；莫立稳；王正国；陶国才；赖西南
来源：中国病理生理杂志 2010 年 26卷 4期
