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目的:探讨地塞米松(DEX)体外对人成骨细胞(OBs)和破骨细胞(OCs)分化的影响.方法:以DEX为主要成分的诱导剂体外刺激正常人骨髓间充质干细胞(MSCs),茜素红染色及碱性磷酸酶(ALP)定量法检测OBs间钙结节形成及OBs中ALP水平;改变DEX浓度后,再检测ALP水平以及用Western blotting检测OBs中磷酸化GSK-3β蛋白的表达;外源性核因子κB受体活化因子配基(RANKL)刺激人骨髓单个核细胞(BMMs)14 d后,用抗酒石酸酸性磷酸酶染色鉴定OCs形成情况、Western blotting检测BMMs中RANKL下游的信号途径;不同浓度DEX刺激MSCs 7 d后,用ELISA和Western blotting检测培养液中可溶性RANKL(sRANKL)水平及MSCs中RANKL蛋白表达.结果:含0.1 μmol/L DEX的诱导剂刺激MSCs后可有钙结节形成,在DEX 0.001-0.1 μmol/L浓度范围内,OBs中ALP水平逐渐增高、磷酸化GSK-3β蛋白表达逐渐增强,当DEX浓度进一步增加后(0.1-10 μmol/L),ALP水平和磷酸化GSK-3β蛋白表达反而下降;外源性RANKL可以诱导BMMs分化为OCs,且BMMs中磷酸化IκBα、SPAK/JNK、p38 MAPK、p44/42 MAPK表达增强;在0.001-10 μmol/L浓度范围内,DEX刺激MSCs后,培养液中 sRANKL水平和MSCs中RANKL蛋白表达逐渐增高,且sRANKL水平和DEX浓度呈正相关(r=0.821,P<0.05).结论:在低浓度(0.001-0.1

作者:许多荣;许辉茹;王荷花;李娟;吴洪福;邓宇斌

来源:中国病理生理杂志 2011 年 27卷 7期

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作者:
许多荣;许辉茹;王荷花;李娟;吴洪福;邓宇斌
来源:
中国病理生理杂志 2011 年 27卷 7期
标签:
地塞米松 成骨细胞 破骨细胞
目的:探讨地塞米松(DEX)体外对人成骨细胞(OBs)和破骨细胞(OCs)分化的影响.方法:以DEX为主要成分的诱导剂体外刺激正常人骨髓间充质干细胞(MSCs),茜素红染色及碱性磷酸酶(ALP)定量法检测OBs间钙结节形成及OBs中ALP水平;改变DEX浓度后,再检测ALP水平以及用Western blotting检测OBs中磷酸化GSK-3β蛋白的表达;外源性核因子κB受体活化因子配基(RANKL)刺激人骨髓单个核细胞(BMMs)14 d后,用抗酒石酸酸性磷酸酶染色鉴定OCs形成情况、Western blotting检测BMMs中RANKL下游的信号途径;不同浓度DEX刺激MSCs 7 d后,用ELISA和Western blotting检测培养液中可溶性RANKL(sRANKL)水平及MSCs中RANKL蛋白表达.结果:含0.1 μmol/L DEX的诱导剂刺激MSCs后可有钙结节形成,在DEX 0.001-0.1 μmol/L浓度范围内,OBs中ALP水平逐渐增高、磷酸化GSK-3β蛋白表达逐渐增强,当DEX浓度进一步增加后(0.1-10 μmol/L),ALP水平和磷酸化GSK-3β蛋白表达反而下降;外源性RANKL可以诱导BMMs分化为OCs,且BMMs中磷酸化IκBα、SPAK/JNK、p38 MAPK、p44/42 MAPK表达增强;在0.001-10 μmol/L浓度范围内,DEX刺激MSCs后,培养液中 sRANKL水平和MSCs中RANKL蛋白表达逐渐增高,且sRANKL水平和DEX浓度呈正相关(r=0.821,P<0.05).结论:在低浓度(0.001-0.1