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目的:探讨微小RNA-196a(miR-196a)在胰腺癌细胞系中表达状况及反义miR-196a对人胰腺癌PANC-1细胞生物学行为的影响.方法:miR-196a采用实时荧光定量PCR检测.人工化学合成反义miR-196a并转染 PANC-1细胞.CCK-8法检测细胞增殖.流式细胞术检测细胞凋亡情况.通过划痕损伤实验和Transwell小室细胞侵袭、迁移实验检测PANC-1细胞侵袭和迁移能力.构建野生型及突变型核因子κB抑制蛋白α(NFKBIA)3′ UTR的萤光素酶报告载体,检测海肾萤光素酶的相对活性以验证miR-196a对NFKBIA mRNA的作用靶点.结果:人胰腺癌细胞系中miR-196a呈高表达;转染反义miR-196a后,PANC-1细胞miR-196a表达下降,其细胞增殖和凋亡无显著改变(P>0.05);而转染反义miR-196a组中通过Transwell小室的细胞数明显低于各对照组 (P<0.01).与各对照组相比,共转染野生型NFKBIA的3′ UTR和反义miR-196a可使海肾萤光素酶相对活性显著提高.结论:miR-196a可能是癌微RNA(oncomiR)之一,有望成为人胰腺癌基因治疗的候选靶点.

作者:张世能;庄晓虹;唐健;庄燕妍;黄凤婷;陈文博;程文捷

来源:中国病理生理杂志 2012 年 28卷 8期

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作者:
张世能;庄晓虹;唐健;庄燕妍;黄凤婷;陈文博;程文捷
来源:
中国病理生理杂志 2012 年 28卷 8期
标签:
胰腺肿瘤 微小RNA 肿瘤侵袭
目的:探讨微小RNA-196a(miR-196a)在胰腺癌细胞系中表达状况及反义miR-196a对人胰腺癌PANC-1细胞生物学行为的影响.方法:miR-196a采用实时荧光定量PCR检测.人工化学合成反义miR-196a并转染 PANC-1细胞.CCK-8法检测细胞增殖.流式细胞术检测细胞凋亡情况.通过划痕损伤实验和Transwell小室细胞侵袭、迁移实验检测PANC-1细胞侵袭和迁移能力.构建野生型及突变型核因子κB抑制蛋白α(NFKBIA)3′ UTR的萤光素酶报告载体,检测海肾萤光素酶的相对活性以验证miR-196a对NFKBIA mRNA的作用靶点.结果:人胰腺癌细胞系中miR-196a呈高表达;转染反义miR-196a后,PANC-1细胞miR-196a表达下降,其细胞增殖和凋亡无显著改变(P>0.05);而转染反义miR-196a组中通过Transwell小室的细胞数明显低于各对照组 (P<0.01).与各对照组相比,共转染野生型NFKBIA的3′ UTR和反义miR-196a可使海肾萤光素酶相对活性显著提高.结论:miR-196a可能是癌微RNA(oncomiR)之一,有望成为人胰腺癌基因治疗的候选靶点.