目的:探讨人胰岛素样生长因子1(hIGF-1)基因转染对大鼠骨骼肌成肌细胞体外缺血再灌注损伤的影响及机制.方法:分别用pLghIGF-1SN质粒(IGF组)和对照质粒pLgGFPSN(GFP 组)转染大鼠成肌细胞.未转染的成肌细胞(control组)作为细胞对照.转染后用免疫细胞化学、RT-PCR及ELISA检测基因表达.转染后3~14 d检测各组细胞的扩增率.转染的细胞接受缺血再灌注损伤后7 d,TUNEL法检测各组细胞的凋亡百分数,RT-PCR 检测各组细胞的bax和bcl-2 mRNA的表达,Western blotting检测各组细胞caspase-3的表达.结果:基因转染后免疫细胞化学和RT-PCR 检测发现IGF组细胞有hIGF-1表达,GFP组和control组细胞未见hIGF-1表达;IGF组细胞上清中可检测到hIGF-1的蛋白表达,control组和GFP组细胞上清中未检测到hIGF-1蛋白表达.转染后14 d,IGF组细胞的扩增率显著大于control组和GFP组(P< 0.05);细胞经缺血再灌注损伤后,TUNEL染色检测结果显示:与GFP组相比,IGF组细胞的凋亡百分比显著降低(P< 0.05);RT-PCR 检测结果显示:与GFP组相比,IGF组细胞的bax mRNA表达显著降低,bcl-2 mRNA的表达显著增加(P< 0.05);Western blotting检测结果显示:与GFP组相比,IGF组细胞caspase-3蛋白表达显著降低.结论:IGF-1基因转染可增加成肌细胞的抗凋亡能力,其机制可
作者:荣书玲;王庸晋;王晓林;赵俊青;贺小峰;胡耀东;刘丽云
来源:中国病理生理杂志 2012 年 28卷 10期