目的:探讨自噬溶酶体抑制剂氯化铵(NH4C1)在维生素K3(VK3)诱导的HeLa细胞凋亡过程中的作用.方法:实验分为4组:正常对照组、30 μmol/L VK3作用组、10 mmol/L NH4Cl作用组和30 μmol/L VK3+ 10mmol/L NH4Cl联合作用组.MTT法检测细胞存活率；吖啶橙(AO)染色观察溶酶体膜通透性变化,单丹磺酰尸胺(MDC)染色观察自噬泡的变化,BCECF-AM染色流式细胞术检测细胞浆pH变化,Hoechst 33342染色检测细胞核染色质凝聚状态及细胞凋亡率.结果:与对照组相比,单独应用NH4Cl对HeLa细胞无明显影响.VK3作用组HeLa细胞存活率降低,AO染色荧光没有变化,细胞内出现自噬泡,细胞浆呈酸性,细胞核染色质凝聚,细胞发生凋亡.NH4Cl与VK3联合作用于HeLa细胞时,与单独应用VK3组相比,溶酶体通透性增加,细胞内自噬泡更加聚集,细胞浆酸性增强,细胞凋亡率明显增加.结论:自噬溶酶体抑制剂NH4Cl促进了VK3诱导的HeLa细胞凋亡,表明自噬可能在VK3诱导的HeLa细胞损伤过程中起到保护作用.
作者：于春艳；刘希；张钰；苏静；刘玉和
来源：中国病理生理杂志 2013 年 29卷 7期
