目的:观察氧葡萄糖剥夺-再恢复(OGDR)后小胶质细胞BV-2 Toll 样受体9(TLR9)激活对神经元凋亡的影响。方法:对BV-2细胞或TLR9-siRNA转染的BV-2细胞进行OGDR处理4 h后,将细胞上清添加至OGDR处理4 h的小鼠原代皮层神经元中,继续正常培养24 h后,倒置显微镜下观察神经元形态变化,TUNEL染色检测神经元凋亡,Western blotting检测神经元caspase-3蛋白的表达。实验分为正常BV-2组、negative control-siRNA组、TLR9-siRNA组、OGDR组、OGDR+NC-siRNA组、OGDR+TLR9-siRNA组和对照组(神经元OGDR后不添加BV-2细胞上清)。结果:OGDR后神经元胞体肿胀,折光性下降,出现空泡样变,轴突变细、扭曲、断裂。 TUNEL染色各组均可见绿染凋亡小体。与对照组比较,其它组的caspase-3蛋白表达升高( P<0.05);与正常BV-2组比较,OGDR组和TLR9-siRNA组的caspase-3蛋白表达升高( P<0.05);OGDR+TLR9-siRNA转染组与TLR9-siRNA转染组和OGDR组比较, caspase-3蛋白表达下降( P<0.05)。结论: OGDR后 BV-2细胞TLR9激活致神经元凋亡增多, caspase-3蛋白表达升高;抑制TLR9表达后,神经元损伤减轻。
作者:彭晴霞;杨碧莹;潘经锐;王鸿轩;黎祥喷;王艺东
来源:中国病理生理杂志 2015 年 3期