目的:研究柚皮苷( naringin,Nar)对高糖( high glucose,HG)诱导人脐静脉内皮细胞( human umbili-cal vein endothelial cells,HUVECs)损伤的作用及对PI3K/AKT/eNOS信号通路的影响。方法:利用 HG(33 mmol/L glucose)培养基孵育HUVECs不同时间(6、12、24、48、72 h)后,用胰岛素(5 mIU/L)刺激细胞15 min,建立内皮细胞损伤模型,分别测定各组上清液中NO水平、细胞中eNOS和磷酸化eNOS( p-eNOS)的水平。对损伤的HUVECs用不同浓度的Nar (5、10、25、50、100 mg/L)孵育不同时间(6、12、24、48和72 h),用胰岛素(5 mIU/L)刺激细胞15 min,检测细胞上清中的NO水平,观察Nar对HG诱导HUVECs 损伤的作用。对损伤细胞先分别用PI3K抑制剂LY294002(10μmol/L)和AKT抑制剂AKT inhibitorⅣ(0.5μmol/L)预处理24 h,再用50 mg/L的Nar处理24 h,用胰岛素(5 mIU/L)刺激细胞15 min,检测细胞上清中NO的水平,以及eNOS、p-eNOS、PI3K、AKT及p-AKT的蛋白水平,探讨Nar减轻HG对HUVECs损伤作用的机制。结果: Nar的量效和时效结果显示,50 mg/L Nar预处理HU-VECs 24 h后,其减轻HG对HUVECs损伤的作用最为显著,表现为NO和p-eNOS的水平升高( P<0.05)。加入PI3K和AKT抑制剂后,Nar减
作者:储佳佳;李积东;雷霖;孔滢;李腾;严国强;沈小丹;温见炳;黄起壬
来源:中国病理生理杂志 2015 年 4期