目的：观察二十二碳六烯酸（ docosahexaenoic acid ，DHA）对外源性H2 O2诱导人视网膜色素上皮细胞凋亡的影响及分子机制。方法：体外培养人视网膜色素上皮细胞系ARPE-19，加入终浓度为12．5 mol／L的H2 O2诱导氧化应激，随后用30～100μmol／L DHA作用细胞4～24 h；real-time PCR和Western blot分别检测血红素氧合酶-1（heme oxygenase-1，HO-1） mRNA和蛋白的表达；比色法分析HO-1酶活性；荧光探针检测活性氧簇（reactive ox-ygen species，ROS）的产生；免疫荧光检测转录因子NF-E2相关因子2（NF-E2-related factor 2，Nrf2）的核转位。最后通过HO-1 siRNA干扰后，流式细胞术观察其对ARPE-19细胞凋亡的影响。结果： DHA能以浓度依赖性方式诱导ARPE-19细胞表达HO-1 mRNA和蛋白，同时，HO-1的酶活性也随着DHA浓度的递增而增强；DHA处理也能诱导Nrf2核转位。此外，H2 O2处理可促进ARPE-19细胞凋亡，并诱导其产生ROS。同时给予100μmol／L DHA处理后，细胞凋亡率和ROS生成显著降低。转染HO-1 siRNA或用HO-1抑制剂ZnPP处理后，可明显降低DHA对细胞凋亡率和ROS的抑制作用。结论：DHA可能通过Nrf2途径诱导视网膜色素上皮细胞表达HO-1，从而发挥对细胞的保护作用。
作者：刘越峰；罗卫民；张勇；钟晓东
来源：中国病理生理杂志 2016 年 32卷 3期
