目的：：研究三结构域蛋白44(tripartite motif-containing protein 44, TRIM44)对肝癌细胞增殖的影响并探讨其分子机制。方法：RT-qPCR和Western blot法分别检测TRIM44在正常肝组织、肝癌组织和癌旁组织,以及永生化肝细胞和肝癌细胞系中的mRNA和蛋白表达水平；在肝癌细胞中转染靶向沉默TRIM44的shRNA,Wes-tern blot实验检测对TRIM44的沉默效果；MTS实验分析TRIM44沉默对肝癌细胞活力的影响,EdU标记实验检测TRIM44沉默对肝癌细胞DNA合成能力的影响；软琼脂集落形成实验检测TRIM44沉默对肝癌细胞锚定非依赖生长能力的影响；Western blot法检测TRIM44沉默对哺乳动物雷帕霉素靶蛋白( mammalian target of rapamycin,mTOR)总蛋白及磷酸化水平的影响；用mTOR激活剂MHY1485处理TRIM44沉默的肝癌细胞,并通过MTS实验分析肝癌细胞的活力。结果：TRIM44的mRNA和蛋白水平在肝癌组织中高于癌旁组织和正常肝组织,TRIM44的mRNA和蛋白水平在肝癌细胞系中高于永生化肝细胞；TRIM44沉默可抑制肝癌细胞的活力、DNA合成能力及锚定非依赖生长能力；TRIM44沉默可降低mTOR磷酸化水平,MHY1485拮抗TRIM44沉默对肝癌细胞活力的抑制作用。结论：TRIM44沉默可能通过下调mTOR活性抑制肝癌细胞增殖。
作者：张蕴蕴；田艺；周伟；孙卯；吴永忠
来源：中国病理生理杂志 2016 年 32卷 11期
