目的:探讨活性氧簇(reactive oxygen species, ROS)介导血管紧张素II(angiotensin II, Ang II)对延髓神经元胞内游离Ca 2+的调节作用及其机制。方法:原代培养延髓神经元;免疫荧光双标法鉴定培养神经元的特征;给予Ang II处理后,用二氢乙啶荧光探针法测定神经元ROS水平;同时或单独给予Ang II和NADPH氧化酶抑制剂apocynin或自由基清除剂TEMPOL后,Fura-2/AM钙瞬变法记录神经元胞内游离Ca2+的水平;CCK-8法检测神经元活性。结果:原代培养的延髓神经元多数为谷氨酸阳性的神经元;Ang II(5μmol/L)可在10 min内显著升高神经元ROS水平(P<0.01);给予Ang II处理后延髓神经元胞内Ca2+水平显著升高(P<0.01);给予apocynin/TEMPOL预处理后,Ang II引起的延髓神经元胞内Ca2+的升高则被抑制(P<0.05)。实验浓度的Ang II对神经元无毒性作用。结论:ROS介导Ang II诱导的延髓神经元胞内Ca2+的升高作用,可能是Ang II在中枢诱导氧化应激作用的潜在细胞内信号机制。
作者:刘小妮;曹冬青;张娜娜;陶然;丁滢泂;金惠铭;卢宁
来源:中国病理生理杂志 2016 年 32卷 12期