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目的:利用RNA干扰技术探讨糖原合成酶激酶3β( GSK-3β)对人瘢痕疙瘩成纤维细胞( keloid fi-broblasts,KFB)的抑制效果。方法:将针对人GSK-3β基因设计合成的3对特异性小干扰RNA(siRNA)分别转染体外培养的人KFB,通过RT-PCR和Western blot 筛选出干扰人KFB GSK-3β基因表达的最佳siRNA,进而转染人KFB,并用RT-PCR和Western blot检测GSK-3β及相关蛋白的mRNA和蛋白表达。结果:1434序列具有最佳的GSK-3βmRNA和蛋白抑制效率。转染GSK-3βsiRNA后,KFB的β-catenin、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、p-GSK-3β和Wnt2的蛋白水平下降,KFB活力下降,且随着培养时间的延长,细胞生长受抑制程度增大,细胞倍增时间明显延迟。结论:转染靶向GSK-3β的siRNA可有效降低该基因在KFB内的表达,从而抑制了瘢痕疙瘩生长,具有潜在的治疗前景。

作者:蔡玉梅;朱世泽;杨维群;潘明孟;王朝阳;吴文艺

来源:中国病理生理杂志 2017 年 33卷 1期

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作者:
蔡玉梅;朱世泽;杨维群;潘明孟;王朝阳;吴文艺
来源:
中国病理生理杂志 2017 年 33卷 1期
标签:
糖原合成酶激酶3β 瘢痕疙瘩 成纤维细胞 RNA干扰 Glycogen synthase kinase-3β Keloid Fibroblasts RNA interference
目的:利用RNA干扰技术探讨糖原合成酶激酶3β( GSK-3β)对人瘢痕疙瘩成纤维细胞( keloid fi-broblasts,KFB)的抑制效果。方法:将针对人GSK-3β基因设计合成的3对特异性小干扰RNA(siRNA)分别转染体外培养的人KFB,通过RT-PCR和Western blot 筛选出干扰人KFB GSK-3β基因表达的最佳siRNA,进而转染人KFB,并用RT-PCR和Western blot检测GSK-3β及相关蛋白的mRNA和蛋白表达。结果:1434序列具有最佳的GSK-3βmRNA和蛋白抑制效率。转染GSK-3βsiRNA后,KFB的β-catenin、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、p-GSK-3β和Wnt2的蛋白水平下降,KFB活力下降,且随着培养时间的延长,细胞生长受抑制程度增大,细胞倍增时间明显延迟。结论:转染靶向GSK-3β的siRNA可有效降低该基因在KFB内的表达,从而抑制了瘢痕疙瘩生长,具有潜在的治疗前景。