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目的:探讨血小板源性生长因子受体α(PDGFRα)对过氧化氢(H2O2)诱导的黑素细胞凋亡的影响.方法:以黑素细胞PIGI为研究对象,分别用不同浓度的H2O2作用后,用MTT法检测细胞活力,并计算半数抑制浓度.经H2O2处理的PIGI细胞转染空载体pCMV6或PDGFRα过表达载体pCMV6-PDGFRα,以不做转染的细胞为空白对照,RT-qPCR和Western blot检测转染效率.用半数抑制浓度的H2O2作用于过表达PDGFRα的PIGI细胞,MTT法检测细胞活力,绘制细胞生长曲线;流式细胞术检测细胞凋亡情况;Western blot检测细胞中p38、磷酸化p38(p-p38)和cleaved caspase-3的蛋白水平;二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCDHF-DA)法检测细胞中活性氧簇(ROS)水平.结果:H2O2作用后PIGI细胞生长减慢,细胞凋亡率升高,细胞中ROS水平、p-p38和cleaved caspase-3蛋白水平升高(P<0.05),H2O2的半数抑制浓度为0.7 mmol/L.PDGFRα过表达载体能够成功上调PIGI细胞中PDGFRα的mRNA和蛋白水平(P <0.05).过表达 PDGFRα 后经过h2O2处理的PIGI细胞存活率升高(P <0.05),细胞凋亡率下降(P<0.05),细胞中的ROS水平下降(P<0.05),p-p38和cleaved caspase-3蛋白水平降低(P<0.05).结论:PDGFRα能够抑制H2O2诱导的黑素细胞凋亡,部分逆转H2O2对黑素细胞增殖的抑制作用,降低细胞中的ROS水平,其作

作者:邓勇;蒋亚辉;万焰;杨和荣;于春水;黄娟

来源:中国病理生理杂志 2017 年 33卷 11期

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作者:
邓勇;蒋亚辉;万焰;杨和荣;于春水;黄娟
来源:
中国病理生理杂志 2017 年 33卷 11期
标签:
黑素细胞 血小板源性生长因子受体α 细胞凋亡 过氧化氢 Melanocytes Platelet-derived growth factor receptor α Apoptosis Hydrogen peroxide
目的:探讨血小板源性生长因子受体α(PDGFRα)对过氧化氢(H2O2)诱导的黑素细胞凋亡的影响.方法:以黑素细胞PIGI为研究对象,分别用不同浓度的H2O2作用后,用MTT法检测细胞活力,并计算半数抑制浓度.经H2O2处理的PIGI细胞转染空载体pCMV6或PDGFRα过表达载体pCMV6-PDGFRα,以不做转染的细胞为空白对照,RT-qPCR和Western blot检测转染效率.用半数抑制浓度的H2O2作用于过表达PDGFRα的PIGI细胞,MTT法检测细胞活力,绘制细胞生长曲线;流式细胞术检测细胞凋亡情况;Western blot检测细胞中p38、磷酸化p38(p-p38)和cleaved caspase-3的蛋白水平;二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCDHF-DA)法检测细胞中活性氧簇(ROS)水平.结果:H2O2作用后PIGI细胞生长减慢,细胞凋亡率升高,细胞中ROS水平、p-p38和cleaved caspase-3蛋白水平升高(P<0.05),H2O2的半数抑制浓度为0.7 mmol/L.PDGFRα过表达载体能够成功上调PIGI细胞中PDGFRα的mRNA和蛋白水平(P <0.05).过表达 PDGFRα 后经过h2O2处理的PIGI细胞存活率升高(P <0.05),细胞凋亡率下降(P<0.05),细胞中的ROS水平下降(P<0.05),p-p38和cleaved caspase-3蛋白水平降低(P<0.05).结论:PDGFRα能够抑制H2O2诱导的黑素细胞凋亡,部分逆转H2O2对黑素细胞增殖的抑制作用,降低细胞中的ROS水平,其作