目的:探讨人参皂苷Rg1对退变人腰椎间盘髓核细胞(HNPCs)生长的调控及其作用机制.方法:培养正常HNPCs,构建HNPCs的氧糖剥夺(OGD)模型模拟退变HNPCs的微环境.光镜观察正常HNPCs和OGD组细胞的形态.分别给予25、50和100 μmol/L人参皂苷Rg1后,用real-time PCR和Western blot法分别检测II型胶原(collagen II)和聚集蛋白聚糖(aggrecan)的表达,CCK-8法检测细胞活力的变化,real-time PCR法检测增殖蛋白Ki67的转录水平,流式细胞术检测细胞凋亡水平,caspase-3试剂盒检测caspase-3活性,Western blot法检测Wnt/β-catenin通路蛋白的表达.加入Wnt/β-catenin通路激活剂LiCl后,检测其对Wnt/β-catenin通路蛋白、细胞活性、细胞凋亡及基质合成蛋白表达的影响.结果:正常HNPCs细胞贴壁快,形态呈类圆形,胞质丰富;OGD组细胞贴壁较慢,形态多为长梭形,胞质减少,初步证实了退变HNPCs模型构建成功.与HNPCs组相比,OGD组中collagen II和aggrecan的mRNA和蛋白表达均显著降低(P<0.05),人参皂苷Rg1可升高collagen II和aggrecan的表达(P<0.05).与HNPCs组相比,OGD组的细胞活力显著降低(P<0.05),Ki67表达下调(P<0.05),而不同浓度的人参皂苷Rg1可增加细胞活力和上调Ki67的表达(P<0.05).同时,不同浓度的人参皂苷Rg1可减少OGD增加的细胞凋亡
作者:鲁花;于露;甄欢欢;刘汝银;岳宗进
来源:中国病理生理杂志 2018 年 34卷 4期