目的:研究枸杞多糖(LBP)对过氧化氢(H2O2)诱导人内皮样细胞EA. hy926氧化损伤的作用及机制.方法:用H2O2建立EA. hy926细胞氧化损伤模型,细胞共分为5个组:正常对照(control)组、模型(damage)组(H2O2,50 mmol/L)、LBP(100 mg/L)组、抗损伤(anti-damage)组(50 mg/L、100 mg/L和200 mg/L LBP+50 mmol/L H2O2)和LY294002(20μmol/L)组.采用CCK-8法检测细胞的活力;用Annexin V/PI双染法流式细胞术检测不同处理后EA. hy926细胞的凋亡;吖啶橙(AO)/溴乙啶( EB)染色法观察细胞凋亡的形态特征;划痕法测定细胞的迁移能力;一氧化氮(NO)试剂盒检测细胞培养上清中NO的水平;用ELISA法测定血管内皮生长因子(VEGF)的水平;Western blot检测cleaved caspase-3、Bax、Bcl-2、内皮型NO合酶(eNOS)、 p-eNOS和p-Akt的蛋白水平.结果:量效结果显示浓度为100 mg/L的LBP预处理EA.hy926细胞1h,然后加入H2O2(50mmol/L)处理24 h对减轻H2O2诱导的EA.hy926细胞损伤的作用最显著.与damage组比较,LBP预处理可提高EA. hy926细胞的活力(P<0.05),减少细胞凋亡(P<0.05),并促进细胞迁移;上清液中VEGF和NO水平升高;Bcl-2/Bax比率明显升高,下调cleaved caspase-3蛋白水平,并上调eNOS和p-eNOS蛋白水平.此外,加入PI3K抑制剂LY294002后,LBP对H2O2损伤的

作者：王玉林；吕林林；王霞；高永清；周兆；刘革修；王林静

来源：中国病理生理杂志 2018 年 34卷 6期