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目的:建立分析CD3+、CD4+和CD8+T细胞Vβ亚家族中免疫抑制性受体程序性细胞死亡蛋白1(PD-1)分子免疫表型的方法,从而了解人体外周血T细胞谱系中PD-1表型细胞的分布频率.方法:收集健康个体(HI)外周血10例,利用抗CD45、CD3、CD4、CD8、PD-1等多色荧光流式单抗,以及T细胞受体(TCR)Vβ谱系试剂盒[IOTest?Beta Mark TCR VβRepertoire Kit,共8管,每一管均为FITC和PE偶联的复合抗体(A~H),每一管复合抗体包含3个TCR Vβ亚家族的抗体],检测T细胞亚群TCR Vβ亚家族中PD-1的分布情况.结果:在10例HI的检测中,CD3+、CD3+CD4+和CD3+CD8+T细胞亚群中检测的24个TCR Vβ亚家族总和符合试剂盒所提供的Quick Reference Card数据,初步结果显示,HI中CD3+T细胞主要优势TCR谱系是Vβ2、Vβ3、Vβ8、Vβ9、Vβ5.1、Vβ13.1和Vβ13.2;而在CD3+CD4+T细胞中的优势利用主要集中在Vβ2、Vβ3、Vβ8、Vβ9、Vβ5.1和Vβ13.1;在CD3+CD8+T细胞中则主要为Vβ1、Vβ2、Vβ3、Vβ9、Vβ13.1和Vβ13.2等亚家族.进一步分析显示PD-1+细胞在HI的CD3+、CD3+CD4+和CD3+CD8+T细胞24个TCR Vβ亚家族中均可以检测到,PD-1+细胞在T细胞各亚群中分布频率有个体差异,在CD4+T细胞中,以Vβ5.2+T细胞的分布频率较高,而在CD8+T细胞中,以Vβ11+和Vβ13.6+T细

作者:陈少华;黄静颖;谭家雄;陈友纯;钟隽;卢育洪;郁志;李扬秋

来源:中国病理生理杂志 2018 年 34卷 12期

知识库介绍

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作者:
陈少华;黄静颖;谭家雄;陈友纯;钟隽;卢育洪;郁志;李扬秋
来源:
中国病理生理杂志 2018 年 34卷 12期
标签:
流式细胞术 T细胞受体 程序性细胞死亡蛋白1 免疫表型
目的:建立分析CD3+、CD4+和CD8+T细胞Vβ亚家族中免疫抑制性受体程序性细胞死亡蛋白1(PD-1)分子免疫表型的方法,从而了解人体外周血T细胞谱系中PD-1表型细胞的分布频率.方法:收集健康个体(HI)外周血10例,利用抗CD45、CD3、CD4、CD8、PD-1等多色荧光流式单抗,以及T细胞受体(TCR)Vβ谱系试剂盒[IOTest?Beta Mark TCR VβRepertoire Kit,共8管,每一管均为FITC和PE偶联的复合抗体(A~H),每一管复合抗体包含3个TCR Vβ亚家族的抗体],检测T细胞亚群TCR Vβ亚家族中PD-1的分布情况.结果:在10例HI的检测中,CD3+、CD3+CD4+和CD3+CD8+T细胞亚群中检测的24个TCR Vβ亚家族总和符合试剂盒所提供的Quick Reference Card数据,初步结果显示,HI中CD3+T细胞主要优势TCR谱系是Vβ2、Vβ3、Vβ8、Vβ9、Vβ5.1、Vβ13.1和Vβ13.2;而在CD3+CD4+T细胞中的优势利用主要集中在Vβ2、Vβ3、Vβ8、Vβ9、Vβ5.1和Vβ13.1;在CD3+CD8+T细胞中则主要为Vβ1、Vβ2、Vβ3、Vβ9、Vβ13.1和Vβ13.2等亚家族.进一步分析显示PD-1+细胞在HI的CD3+、CD3+CD4+和CD3+CD8+T细胞24个TCR Vβ亚家族中均可以检测到,PD-1+细胞在T细胞各亚群中分布频率有个体差异,在CD4+T细胞中,以Vβ5.2+T细胞的分布频率较高,而在CD8+T细胞中,以Vβ11+和Vβ13.6+T细