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目的:观察二氧化硫(SO2)衍生物亚硫酸钠和亚硫酸氢钠对支气管上皮细胞NLRP3炎症小体活化的影响.方法:使用不同浓度的SO2衍生物作用于支气管上皮细胞16HBE,通过流式细胞术检测细胞内活性氧簇(ROS)的生成,Western blot检测细胞内NLRP3和caspase-1 p20蛋白水平,ELISA检测细胞上清中白细胞介素1β(IL-1β)的分泌水平,结合细胞毒性实验(MTT)确定2 mmol/L为SO2衍生物的实验浓度.采用RNA干扰技术沉默16HEB细胞NLRP3基因及ROS清除剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)预处理16HBE细胞,通过流式细胞术检测细胞内ROS,Western blot和ELISA分别检测NLRP3和caspase-1 p20蛋白表达及IL-1β分泌水平.结果:与对照组比较,2 mmol/L和4 mmol/L SO2衍生物组细胞内ROS水平、NLRP3和caspase-1 p20蛋白表达及细胞上清液中IL-1β水平明显升高(P<0.05).与2 mmol/L SO2衍生物组比较,NLRP3 siRNA组细胞内的NLRP3和caspase-1 p20蛋白水平明显降低(P<0.05),且细胞上清液中IL-1β的浓度明显下降(P<0.05),ROS无明显变化;NAC组NLRP3和caspase-1 p20蛋白水平及IL-1β浓度均明显下降(P<0.05).结论:SO2衍生物激活支气管上皮细胞NLRP3炎症小体,促进IL-1β生成.

作者:陈丽;刘华勇;骆文志;陈嘉伟;吴义;黄志宏;刘升明

来源:中国病理生理杂志 2019 年 35卷 4期

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作者:
陈丽;刘华勇;骆文志;陈嘉伟;吴义;黄志宏;刘升明
来源:
中国病理生理杂志 2019 年 35卷 4期
标签:
SO2衍生物 NLRP3炎症小体 气道炎症 活性氧簇
目的:观察二氧化硫(SO2)衍生物亚硫酸钠和亚硫酸氢钠对支气管上皮细胞NLRP3炎症小体活化的影响.方法:使用不同浓度的SO2衍生物作用于支气管上皮细胞16HBE,通过流式细胞术检测细胞内活性氧簇(ROS)的生成,Western blot检测细胞内NLRP3和caspase-1 p20蛋白水平,ELISA检测细胞上清中白细胞介素1β(IL-1β)的分泌水平,结合细胞毒性实验(MTT)确定2 mmol/L为SO2衍生物的实验浓度.采用RNA干扰技术沉默16HEB细胞NLRP3基因及ROS清除剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)预处理16HBE细胞,通过流式细胞术检测细胞内ROS,Western blot和ELISA分别检测NLRP3和caspase-1 p20蛋白表达及IL-1β分泌水平.结果:与对照组比较,2 mmol/L和4 mmol/L SO2衍生物组细胞内ROS水平、NLRP3和caspase-1 p20蛋白表达及细胞上清液中IL-1β水平明显升高(P<0.05).与2 mmol/L SO2衍生物组比较,NLRP3 siRNA组细胞内的NLRP3和caspase-1 p20蛋白水平明显降低(P<0.05),且细胞上清液中IL-1β的浓度明显下降(P<0.05),ROS无明显变化;NAC组NLRP3和caspase-1 p20蛋白水平及IL-1β浓度均明显下降(P<0.05).结论:SO2衍生物激活支气管上皮细胞NLRP3炎症小体,促进IL-1β生成.