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目的 ·探讨金雀异黄素(genistein,Gen)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导小胶质细胞炎症反应的抑制作用.方法 ·取新生1d的C57BL/6J小鼠分离原代小胶质细胞进行培养,并分为LPS组、Gen+LPS组、对照组.LPS组给予LPS(1μg/mL)处理24 h,Gen+LPS组给予Gen(10 μmol/L)预处理0.5 h后加入LPS(1μg/mL)处理24 h,对照组不做处理.采用Western blotting分析CD11b蛋白的表达,采用MitoSOXTM红色试剂和CM-H2DCFDA分别观察线粒体活性氧(reactive oxygen species,ROS)和细胞内ROS水平,通过免疫荧光染色、比色法和ELISA法分别检测NLRP3 (NLR family pyrin domain containing 3)炎症小体、胱天蛋白酶1(caspase-1)和白细胞介素1β (interleukin-1β,IL-1β)的变化.结果 ·与对照组比较,LPS组小胶质细胞CD11b蛋白水平,及线粒体、细胞内ROS水平均显著升高(均P<0.05),而Gen+LPS组明显低于LPS组(均P<0.05).此外,LPS组小胶质细胞NLRP3炎症小体免疫荧光强度、caspase-1活性和IL-1 β分泌显著高于对照组(均P<0.05);与LPS组相比,Gen+LPS组均明显下降(均P<0.05).结论 ·Gen可抑制LPS诱导的小胶质细胞线粒体ROS生成、NLRP3炎症小体活化和炎症因子IL-1β分泌等炎症反应.

作者:王红梅;付剑亮;张婷;陈静炯;赵玉武

来源:上海交通大学学报(医学版) 2019 年 39卷 5期

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作者:
王红梅;付剑亮;张婷;陈静炯;赵玉武
来源:
上海交通大学学报(医学版) 2019 年 39卷 5期
标签:
金雀异黄素 小胶质细胞 脂多糖 炎症 NLRP3炎症小体 活性氧
目的 ·探讨金雀异黄素(genistein,Gen)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导小胶质细胞炎症反应的抑制作用.方法 ·取新生1d的C57BL/6J小鼠分离原代小胶质细胞进行培养,并分为LPS组、Gen+LPS组、对照组.LPS组给予LPS(1μg/mL)处理24 h,Gen+LPS组给予Gen(10 μmol/L)预处理0.5 h后加入LPS(1μg/mL)处理24 h,对照组不做处理.采用Western blotting分析CD11b蛋白的表达,采用MitoSOXTM红色试剂和CM-H2DCFDA分别观察线粒体活性氧(reactive oxygen species,ROS)和细胞内ROS水平,通过免疫荧光染色、比色法和ELISA法分别检测NLRP3 (NLR family pyrin domain containing 3)炎症小体、胱天蛋白酶1(caspase-1)和白细胞介素1β (interleukin-1β,IL-1β)的变化.结果 ·与对照组比较,LPS组小胶质细胞CD11b蛋白水平,及线粒体、细胞内ROS水平均显著升高(均P<0.05),而Gen+LPS组明显低于LPS组(均P<0.05).此外,LPS组小胶质细胞NLRP3炎症小体免疫荧光强度、caspase-1活性和IL-1 β分泌显著高于对照组(均P<0.05);与LPS组相比,Gen+LPS组均明显下降(均P<0.05).结论 ·Gen可抑制LPS诱导的小胶质细胞线粒体ROS生成、NLRP3炎症小体活化和炎症因子IL-1β分泌等炎症反应.