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目的:探讨长链非编码RNA ZFAS1是否通过调控微小RNA-150(miR-150)/ROCK1促进血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖和迁移,及其参与动脉粥样硬化发生发展的机制.方法:用血小板源性生长因子BB(PDGF-BB)诱导VSMCs增殖和迁移.用real-time PCR法检测VSMCs中ZFAS1的表达水平.进一步用小干扰RNA(siRNA)下调ZFAS1表达后,采用MTT和EdU法检测VSMCs的活力和增殖能力,采用Transwell法检测VSMCs的迁移能力,采用real-time PCR检测miR-150和ROCK1的表达水平,Western blot检测ROCK1蛋白的表达水平.萤光素酶报告基因实验验证RCOK1为miR-150的靶基因.最后,抑制miR-150表达,检测下调ZFAS1表达后VSMCs的增殖、迁移及ROCK1表达.结果:PDGF-BB上调VSMCs中ZFAS1的表达.下调ZFAS1表达后,VSMCs的增殖和迁移受到抑制(P<0.05),miR-150表达水平上升(P<0.05),ROCK1表达水平下降(P<0.05).萤光素酶报告基因实验结果显示miR-150能直接靶向调控ROCK1.抑制miR-150表达后,能减弱下调ZFAS1表达导致的VSMCs增殖和迁移的抑制作用(P<0.05),上调ROCK1的表达水平(P<0.05).结论:ZFAS1通过调控miR-150/ROCK1促进PDGF-BB诱导的VSMCs增殖和迁移.

作者:王秋;黄伟剑

来源:中国病理生理杂志 2019 年 35卷 11期

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作者:
王秋;黄伟剑
来源:
中国病理生理杂志 2019 年 35卷 11期
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长链非编码RNAZFAS1 血管平滑肌细胞 细胞增殖 细胞迁移 微小RNA-150 ROCK1蛋白
目的:探讨长链非编码RNA ZFAS1是否通过调控微小RNA-150(miR-150)/ROCK1促进血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖和迁移,及其参与动脉粥样硬化发生发展的机制.方法:用血小板源性生长因子BB(PDGF-BB)诱导VSMCs增殖和迁移.用real-time PCR法检测VSMCs中ZFAS1的表达水平.进一步用小干扰RNA(siRNA)下调ZFAS1表达后,采用MTT和EdU法检测VSMCs的活力和增殖能力,采用Transwell法检测VSMCs的迁移能力,采用real-time PCR检测miR-150和ROCK1的表达水平,Western blot检测ROCK1蛋白的表达水平.萤光素酶报告基因实验验证RCOK1为miR-150的靶基因.最后,抑制miR-150表达,检测下调ZFAS1表达后VSMCs的增殖、迁移及ROCK1表达.结果:PDGF-BB上调VSMCs中ZFAS1的表达.下调ZFAS1表达后,VSMCs的增殖和迁移受到抑制(P<0.05),miR-150表达水平上升(P<0.05),ROCK1表达水平下降(P<0.05).萤光素酶报告基因实验结果显示miR-150能直接靶向调控ROCK1.抑制miR-150表达后,能减弱下调ZFAS1表达导致的VSMCs增殖和迁移的抑制作用(P<0.05),上调ROCK1的表达水平(P<0.05).结论:ZFAS1通过调控miR-150/ROCK1促进PDGF-BB诱导的VSMCs增殖和迁移.