目的:研究 PI3K/Akt信号通路是否通过下游糖原合成酶激酶 3β(GSK-3β)途径调控 ABC转运蛋白的表达参与人结肠癌 HCT-15细胞的多药耐药.方法:选用人结肠癌 HCT-15细胞为实验对象,分别采用 GSK-3β抑制剂(HY-19807)和 PI3K/Akt通路抑制剂(HY-13898)处理细胞.CCK-8法检测奥沙利铂对细胞的半数抑制浓度,计算抑制率及耐药指数.Western blot法检测细胞内 Akt 、p-Akt 、GSK-3β、p-GSK3β-Ser9及 ABC转运蛋白(P-gp和 MRP-2)的水平.RT-qPCR法检测各组细胞内 ABC转运蛋白 mRNA的表达变化.流式细胞术检测不同抑制剂对细胞周期的影响.结果:应用 GSK-3β抑制剂 HY-19807处理后的 HCT-15细胞,其奥沙利铂半数抑制浓度较对照组明显上升,并出现 p-GSK3β-Ser9、P-gp和 MRP-2蛋白水平的上调(P ＜ 0.05),Akt及 p-Akt的蛋白水平变化不明显(P ＞0.05);RT-qPCR结果同样为 ABCB1 和 ABCC2的 mRNA表达量升高(P ＜0.01);同时细胞周期检测结果显示 HY-19807处理能够促进 HCT-15细胞由 G 1期向 S期过渡,细胞增殖旺盛.而应用 PI3K/Akt通路抑制剂 HY-13898作用于 HCT-15细胞后,其奥沙利铂半数抑制浓度较对照组下降,并出现 p-GSK3自-Ser9、p-Akt,P-gp和 MRP-2的蛋白水平下调(P ＜0.01);RT-qPCR检测结果同样为 ABCB1 和 ABCC2的 mRNA

作者：袁亚男；严晓丽；黄艳洁；杜梦楠；郑纪宁

来源：中国病理生理杂志 2019 年 35卷 12期