目的:探讨垂体肿瘤转化基因(PTTG1)调控结直肠癌细胞凋亡及其与磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(AKT)信号通路的关系.方法:使用慢病毒感染系统构建PTTG1基因过表达和干扰表达的HCT116人结直肠癌细胞稳定细胞株,随机分为空白对照组(A组),阴性对照组(B组),PTTG1敲除组(C组)和PTTG1过表达组(D组).采用免疫印迹实验(Western blotting法)及实时RT-PCR检测不同稳定细胞株中PTTG1及PTTG1 mRNA的表达,分别采用CCK-8、流式细胞术、Transwells小室对细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭情况进行检测.比较各组PTTG1及PTTG1 mRNA水平的表达、细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭情况,并分析PTTG1对PI3K/AKT信号通路的影响.结果:与A组比较,C组的PTTG1 mRNA表达明显降低,D组的明显升高(P<0.05).C组PTTG1蛋白表达低于B组,D组高于B组(P<0.05).A组、B组、C组的细胞增殖能力比较,差异无统计学意义(P>0.05);D组的细胞增殖能力明显低于其他3组(P<0.05).D组凋亡的细胞数均明显高于其他3组(P<0.05).D组的细胞迁移个数和侵袭个数均明显低于其他3组(P<0.05).PTTG1上调可抑制PI3K表达,造成PI3K/AKT通路失活.进一步使用PI3K激动剂(740Y-P)和AKT激动剂(PDGF)反向逆转,发现PTTG1对PI3K/AKT信号通路同样存在抑制作用.结论:PTTG1基因
作者:刘军;齐秀恒;武振明;王帅兵;董久兴
来源:广西医科大学学报 2020 年 37卷 12期