目的:探讨微小RNA-323(miR-323)对缺氧诱导大鼠心肌H9C2细胞凋亡的影响及其机制.方法:建立缺氧损伤的H9C2细胞模型,在H9C2细胞转染anti-miR-323、pcDNA-FGF9和si-FGF9,并缺氧处理48 h.采用qPCR检测miR-323的表达, Western blot检测成纤维细胞生长因子9( FGF9)、cleaved caspase-3、c-Jun氨基末端激酶(JNK)和p-JNK的蛋白水平,MTT比色法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡.生物学信息预测miR-323的靶基因并用双萤光素酶报告基因进一步验证.结果: 缺氧明显降低H9C2 细胞12 h、24 h和48 h的细胞活力(P＜0.05),显著提高细胞凋亡率和cleaved caspase-3的蛋白水平(P＜0.05),效应均呈时间依赖性.缺氧处理的H9C2细胞中miR-323和p-JNK水平上调,FGF9蛋白表达下调(P＜0.05).下调miR-323表达或过表达FGF9显著提高缺氧处理的H9C2细胞活力,降低细胞凋亡率和cleaved caspase-3 蛋白的水平( P＜0.05). FGF9 是miR-323的靶基因.下调FGF9表达逆转下调miR-323表达对缺氧诱导H9C2细胞损伤的抑制作用. miR-323调控FGF9影响p-JNK水平.结论: miR-323通过靶向FGF9调节JNK信号通路,从而影响缺氧处理心肌H9C2 细胞的活力和凋亡.
作者：张邻川；郑武扬；唐文明
来源：中国病理生理杂志 2020 年 36卷 2期
