目的:分离、培养及鉴定大鼠腹膜源肥大细胞外泌体.方法:提取8～10周龄SPF级雌性SD大鼠腹腔灌洗液,使用Percoll密度梯度分离法分离灌洗液中的肥大细胞,通过甲苯胺蓝染色鉴定肥大细胞,在细胞培养板中加入白细胞介素3和干细胞生长因子诱导肥大细胞成熟,收集细胞上清液,采用超速离心法分离上清液中的外泌体,通过透射电镜,纳米流式细胞仪从外泌体形态、粒径和表面标志蛋白三个方面鉴定外泌体.结果:分离得到的肥大细胞被甲苯胺蓝染成蓝紫色,分离的肥大细胞外泌体呈典型盘状,粒径分布范围为30～150 nm,平均粒径为75.33 nm,外泌体表面标志蛋白CD9和CD81呈阳性表达.结论:Percoll密度梯度分离法联合超速离心法分离大鼠腹腔灌洗液中肥大细胞外泌体的方法是可行的.
作者：王楷；侯雨君；廖晨希；谭玉；王路；陈颖；周思远
来源：中国病理生理杂志 2022 年 38卷 6期
