目的:探讨肾损伤分子1(KIM-1)对晚期糖基化终末产物(AGEs)诱导的人近端肾小管上皮HK-2细胞上皮-间充质转化(EMT)和凋亡的影响及其可能的机制.方法:将HK-2细胞分为对照组、AGEs组、AGEs+阴性对照小干扰RNA(NC siRNA)组和AGEs+KIM-1 siRNA组.免疫荧光检测KIM-1蛋白的表达;Western blot检测KIM-1、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-cadherin、Bcl-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、caspase-3、细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)和磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)蛋白水平;RT-qPCR检测KIM-1 mRNA的表达;MTS检测细胞活力;TUNEL染色和annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡;流式细胞术检测细胞活性氧(ROS)水平.结果:与对照组比较,AGEs处理后的HK-2细胞中KIM-1蛋白、KIM-1 mRNA和α-SMA蛋白表达呈时间依赖性升高,E-cadherin蛋白表达和细胞活力呈时间依赖性降低,凋亡率呈时间依赖性升高,Bcl-2蛋白表达降低,Bax和caspase-3蛋白表达增加,ROS水平和ERK1/2磷酸化水平显著升高(P<0.05或P<0.01).转染KIM-1 siRNA能够在AGEs条件下减少HK-2细胞中KIM-1的表达(P<0.01).与AGEs+NC siRNA组相比,敲减KIM-1的HK-2细胞经AGEs诱导后,细胞α-SMA蛋白表达显著降低,E-cadherin蛋白表达和细胞活力显著升高,细胞凋亡率显著降低,Bcl-2蛋白表达增加,Bax
作者:张霄;张睿;吴妍;李宁;曹雷;张长庚
来源:中国病理生理杂志 2022 年 38卷 11期