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目的在大肠埃希菌中表达磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶(phospholipid hydroperoxide glutathioneperoxidase,PHGPx),以期用于抗PHGPx抗体的制备.方法用特异引物从基因文库中扩增出PHGPxcDNA,与表达载体重组,转化大肠埃希菌.重组体中的PHGPx经点突变作用,编码硒半胱氨酸的密码子UGA变为编码半胱氨酸的UGU.结果序列分析表明,克隆载体中包含PHGPx的完整编码序列及3'未翻译区序列;经SDS-PAGE及Western Blot证实PHGPx在大肠埃希菌中获得了成功表达.结论突变的PGPGx可以在大肠埃希菌中高效表达并可用于制备抗PHGPx抗体.

作者:赵文然;周令望;刘艺;钟学宽

来源:中国地方病学杂志 2004 年 23卷 2期

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作者:
赵文然;周令望;刘艺;钟学宽
来源:
中国地方病学杂志 2004 年 23卷 2期
标签:
磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶 克隆 点突变 表达
目的在大肠埃希菌中表达磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶(phospholipid hydroperoxide glutathioneperoxidase,PHGPx),以期用于抗PHGPx抗体的制备.方法用特异引物从基因文库中扩增出PHGPxcDNA,与表达载体重组,转化大肠埃希菌.重组体中的PHGPx经点突变作用,编码硒半胱氨酸的密码子UGA变为编码半胱氨酸的UGU.结果序列分析表明,克隆载体中包含PHGPx的完整编码序列及3'未翻译区序列;经SDS-PAGE及Western Blot证实PHGPx在大肠埃希菌中获得了成功表达.结论突变的PGPGx可以在大肠埃希菌中高效表达并可用于制备抗PHGPx抗体.