目的在真核细胞中表达人磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶(PHGPx)并制备抗PHGPx多克隆抗体.方法用特异引物从人睾丸组织cDNA文库中扩增出人线粒体型PHGpx cDNA,与真核表达载体pcDNA3.1/His重组,在COS-1细胞内表达PHGPx.用大肠杆菌表达的突变的PHGPx免疫动物,制备抗PHGPx抗体.结果重组体pcDNA-PHGPx转染的COS-1细胞表达了人PHGPx融合蛋白,PHGPx活性为111.5μmol·mg-1·min-1,高于对照组5倍.免疫扩散测得抗PHGPx多克隆抗血清滴度为1:16;用于蛋白印迹时稀释倍数为1:500,可见特异免疫沉淀条带.结论人PHGPx在COS-1细胞内获得了表达,抗PHGPx多克隆抗体有特异性,可以用于重组表达的PHGPx的鉴定.
作者：赵文然；钟翔宇；孙辉；周令望；曲章义；钟学宽
来源：中国地方病学杂志 2006 年 25卷 1期
