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目的观察转染磷脂过氧化氢谷胱甘肽过氧化物酶(PHGPx)基因对神经毒物质Aβ及H2O2诱导细胞凋亡的保护作用.方法通过基因转染和筛选得到稳定高表达PHGPx基因的PC12 细胞,加入神经毒物质Aβ及H2O2, 采用电镜、DNA片段化测定、MTT比色微量分析及流式细胞凋亡率分析等方法观察转基因后抗逆变致凋亡的能力.结果加入神经毒物质Aβ或H2O2后,未转染PHGPx基因的PC12 细胞出现凋亡的特征性形态学改变,电泳可见断裂的DNA片段,流式细胞仪检测细胞凋亡率较转染组明显增加.MTT比色微量分析显示细胞活力下降(均P<0.01).结论 Aβ及H2O2能够诱导神经细胞凋亡.转染PHGPx基因能对抗Aβ、H2O2的神经毒性,保护Aβ、H2O2所致的神经细胞损伤凋亡,是AD等有活性氧参与的神经退行性疾病的一种新的基因干预治疗思路.

作者:付振涛;杨玲玲;郝建荣;曾季平;孔峰;钟华;崔行

来源:中国老年学杂志 2004 年 24卷 10期

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作者:
付振涛;杨玲玲;郝建荣;曾季平;孔峰;钟华;崔行
来源:
中国老年学杂志 2004 年 24卷 10期
标签:
磷脂过氧化氢谷胱甘肽过氧化物酶 β淀粉样肽 阿尔茨海默病 细胞凋亡
目的观察转染磷脂过氧化氢谷胱甘肽过氧化物酶(PHGPx)基因对神经毒物质Aβ及H2O2诱导细胞凋亡的保护作用.方法通过基因转染和筛选得到稳定高表达PHGPx基因的PC12 细胞,加入神经毒物质Aβ及H2O2, 采用电镜、DNA片段化测定、MTT比色微量分析及流式细胞凋亡率分析等方法观察转基因后抗逆变致凋亡的能力.结果加入神经毒物质Aβ或H2O2后,未转染PHGPx基因的PC12 细胞出现凋亡的特征性形态学改变,电泳可见断裂的DNA片段,流式细胞仪检测细胞凋亡率较转染组明显增加.MTT比色微量分析显示细胞活力下降(均P<0.01).结论 Aβ及H2O2能够诱导神经细胞凋亡.转染PHGPx基因能对抗Aβ、H2O2的神经毒性,保护Aβ、H2O2所致的神经细胞损伤凋亡,是AD等有活性氧参与的神经退行性疾病的一种新的基因干预治疗思路.