目的 了解转录因子ETS-1介导亚砷酸钠(NaAsO2)对人正常肝细胞L-02的微小RNA (miRNA,miR)-21表达的影响.方法 量-效关系研究:采用不同剂量NaAsO2[0.0(对照)、2.5,5.0,10.0,20.0,40.0 μmol/L]作用L-)2细胞24 h(n=6).时-效关系研究:采用0(对照)、20 μmol/L NaAsO2作用L-02细胞12、24、36、48 h(n=6).分别采用ETS-1短发夹RNA(shRNA)和miR-21 inhibitor对ETS-1和miR-21的表达进行干预.ETS-1 shRNA(100 nmol/L)处理分为4组:①ETS-1 shRNA对照(NC)处理组;②ETS-1 shRNA NC联合NaAsO2(20 μmol/L)处理组;③ETS-1 shRNA处理组;④ETS-1 shRNA联合NaAsO2(20 μmol/L)处理组.miR-21 inhibitor(100 nmol/L)处理分为4组:①miR-21 inhibitor NC处理组;②miR-21 inhibitor NC联合NaAsO2(20 μmol/L)处理组;③miR-21inhibitor处理组;④miR-21 inhibitor联合NaAsO2(20 μmol/L)处理组.采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测各组L-02细胞ETS-1 mRNA、miR-21表达;蛋白免疫印迹法检测ETS-1蛋白表达.结果 量-效关系研究:0.0(对照)、2.5、5.0、10.0、20.0、40.0 μmol/L组ETS-1 mRNA表达分别为1.008±0.028、1.552±0.029、1.697±0.050、1.842±0.077、2.233±0.096、2.235±0.092;miR-21表达分别为1.025±0.094、1.552±0.072
作者:齐财华;张爱华;陈雄;孙宝飞
来源:中华地方病学杂志 2017 年 36卷 1期