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目的 探讨硒对一氧化氮(NO)介导心肌细胞凋亡的保护性作用.方法 将体外培养的AC16心肌细胞分为对照组、硒处理组、硝普钠(sodium nitroprusside,SNP)处理组、硒+SNP处理组,SNP为外源性NO供体.对照组无任何干预,加入与各处理组等体积的培养液,硒处理组加入的硒剂量为100 μg/L,SNP处理组加入的SNP剂量为1.0 mmol/L,硒+SNP组在100μg/L硒预处理4h后加入1.0 mmol/L SNP;培养24 h后收集细胞或上清液.采用Griess法检测上清液NO含量,流式细胞仪检测细胞活性氧水平,荧光倒置显微镜下观察细胞膜电位变化情况及细胞凋亡状况,实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹法检测细胞凋亡相关基因B淋巴细胞瘤-2 (Bcl-2)相关X蛋白(Bax)、Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平.结果 对照组、硒处理组、SNP处理组和硒+SNP处理组NO含量分别为(10.3±1.8)、(9.2±2.1)、(15.2±3.5)、(14.3±2.6) μmmol/L,SNP对NO含量存在主效应(F=23.33,P<0.05);细胞活性氧水平分别为31.63±1.40、29.52±2.86、60.62±4.83、50.08±2.41,硒、SNP对活性氧水平存在主效应(F=12.19、187.20,P均<0.05),二者也存在交互效应(F=5.42,P<0.05);细胞线粒体膜电位水平分别为0.42±0.11、0.37±0.07、7.25±1.91、5.21±1.59,硒、SNP对细胞线粒体膜电位水平存在主效应(F=1

作者:王颖婷;杜培儒;谭武红

来源:中华地方病学杂志 2019 年 38卷 5期

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作者:
王颖婷;杜培儒;谭武红
来源:
中华地方病学杂志 2019 年 38卷 5期
标签:
一氧化氮 硒 细胞凋亡 Nitric oxide Selenium Apoptosis
目的 探讨硒对一氧化氮(NO)介导心肌细胞凋亡的保护性作用.方法 将体外培养的AC16心肌细胞分为对照组、硒处理组、硝普钠(sodium nitroprusside,SNP)处理组、硒+SNP处理组,SNP为外源性NO供体.对照组无任何干预,加入与各处理组等体积的培养液,硒处理组加入的硒剂量为100 μg/L,SNP处理组加入的SNP剂量为1.0 mmol/L,硒+SNP组在100μg/L硒预处理4h后加入1.0 mmol/L SNP;培养24 h后收集细胞或上清液.采用Griess法检测上清液NO含量,流式细胞仪检测细胞活性氧水平,荧光倒置显微镜下观察细胞膜电位变化情况及细胞凋亡状况,实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹法检测细胞凋亡相关基因B淋巴细胞瘤-2 (Bcl-2)相关X蛋白(Bax)、Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平.结果 对照组、硒处理组、SNP处理组和硒+SNP处理组NO含量分别为(10.3±1.8)、(9.2±2.1)、(15.2±3.5)、(14.3±2.6) μmmol/L,SNP对NO含量存在主效应(F=23.33,P<0.05);细胞活性氧水平分别为31.63±1.40、29.52±2.86、60.62±4.83、50.08±2.41,硒、SNP对活性氧水平存在主效应(F=12.19、187.20,P均<0.05),二者也存在交互效应(F=5.42,P<0.05);细胞线粒体膜电位水平分别为0.42±0.11、0.37±0.07、7.25±1.91、5.21±1.59,硒、SNP对细胞线粒体膜电位水平存在主效应(F=1