背景与目的 血管平滑肌细胞(VSMC)凋亡在许多血管钙化疾病的病理过程中起关键作用.近期研究表明,赖氨酸甲基转移酶SET8参与调节细胞增殖、凋亡过程.文章旨在探寻SET8是否通过调节VSMC增殖、凋亡而影响血管钙化.方法 体外培养原代大鼠VSMC,将VSMC随机分为正常对照组、空质粒组和SET8-shRNA组.以脂质体LipofectamineTM2000为载体,转染VSMC.采用茜素红染色法和钙含量测定法判断细胞钙化程度;采用MTT法检测三组细胞的增殖能力;实时荧光定量PCR、Westem blot法检测三组细胞中增殖基因Survivin和凋亡基因Caspase-3的表达水平,分析干扰SET8对VSMC增殖、凋亡及其相关基因和蛋白表达的影响.结果 ①干扰SET8可成功抑制VSMC中SET8蛋白的表达(P＜0.05).②转染VSMC后,与正常对照组和空质粒组比较,SET8-shRNA组钙含量明显升高(P＜0.05).③MTT结果显示,在第12 h、24h、36 h、48 h,SET8-shRNA组VSMC的增殖能力较正常对照组和空质粒组明显降低(P＜0.05).④实时荧光定量PCR和Western blot结果显示SET8-shRNA组Survivin的mRNA和蛋白表达较正常对照组和空质粒组明显下降,而Caspase-3的mRNA和蛋白表达则相反(P＜0.05).结论 干扰SET8能够增加促凋亡基因表达,抑制增殖基因表达,SET8有可能参与调节大鼠血管钙化.
作者：张东雪；李同妙；高少辉；张胜雷
来源：中国动脉硬化杂志 2018 年 26卷 1期
