背景与目的 GRP75(glucose regulated protein 75)属于热休克蛋白(hot shock protein,HSP)家族,是一种主要位于线粒体的分子伴侣,在某些耐药的肿瘤细胞中高表达.本研究通过慢病毒介导的RNA干扰技术沉默GRP75基因的表达,观察下调GRP75的表达对肿瘤细胞耐药性的影响并探讨GRP75在肿瘤细胞耐药机制中的作用.方法 以顺铂为诱导药物,人肺腺癌细胞系A549为诱导对象,采用逐步增加剂量与大剂量冲击相结合的方法,诱导建立耐顺铂细胞株A549/CDDP.分别将包裹GRP75-shRNA和不含干扰序列的慢病毒转染A549和A549/CDDP细胞,在荧光显微镜下观察各组细胞转染率,应用MTT比色法检测干扰前后各组细胞对顺铂的敏感性,应用Western blot检侧干扰前后各组细胞GRP75,p53,bd-2的表达.结果 各组细胞感染效率均在90
作者:石思恩;何泽锋;蔡建春;邱江锋
来源:中国肺癌杂志 2011 年 14卷 4期