背景与目的已有的研究表明：Toll样受体5（toll-likereceptor5,TLR5）在肿瘤起始和发展中发挥重要作用。我们前期研究发现，TLR5在非小细胞肺癌（non-smallcelllungcancer,NSCLC）组织中高表达，但其在NSCLC高表达后的信号通路活化情况的研究并不多见。本研究旨在探讨TLR5在不同NSCLC细胞株上的表达，及其在NSCLC细胞中活化的机制。方法用免疫荧光、RT-PCR和Westernblot方法检测TLR5在三种不同NSCLC细胞株中的表达。分别用0μg/mL、0.01μg/mL、0.1μg/mL、1μg/mL、5μg/mL、10μg/mL的鞭毛蛋白刺激，用NF-κB荧光素酶报告基因质粒瞬时转染后，检测细胞内NF-κB荧光素酶的活性。选择TLR5表达最高的SPC-A-1细胞株为实验对象，选择0.1μg/mL的鞭毛蛋白，分别用0μg/mL、0.01μg/mL、0.1μg/mL、1μg/mL、10μg/mL的TLR5抗体抑制通路活化，检测细胞内NF-κB荧光素酶的活性，验证TLR5活化通路。构建TLR5-shRNA，转染SPC-A-1细胞48h后，以0.1μg/mL浓度鞭毛蛋白分别刺激SPC-A-1细胞及转染的SPC-A-1细胞，在刺激0min、10min、30min、60min，用Westernblot方法比较TLR5信号通路因子p-IKBα、p-ERK1/2、p-JNK、IKBα、ERK1/2的变化。结果TLR5在肺腺癌细胞株SPC-A-1中呈高表达，且主要表达在细胞膜上。三种细胞株

作者：周辉；罗媚；亦戈；马安迪；罗永忠；易青；陈建华；肖玲

来源：中国肺癌杂志 2015 年 1期