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目的 探讨小干扰RNA(siRNA)抑制胸腺生成素( TMPO)基因的表达对肺癌A549细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制.方法 采用脂质体转染法将TMPO siRNA转染至人肺癌A549细胞,将转染siRNA control作为阴性对照组.转染后48 h,采用实时荧光定量聚合酶链式反应( RT?PCR)和Western blot检测转染后细胞中TMPO的表达水平,四甲基偶氮唑蓝( MTT)法检测细胞的增殖情况,流式细胞术检测细胞周期和细胞的凋亡情况,Western blot检测细胞中PCNA、cleaved caspase?3、Notch1和mTOR的表达水平.结果 RT?PCR检测结果显示,空白对照组、阴性对照组和转染组细胞中TMPO mRNA的表达水平分别为1.01±0.11、0.99±0.10和0.36± 0.04. Western blot检测结果显示,空白对照组、阴性对照组和转染组细胞中TMPO蛋白的表达水平分别为0.27±0.02、0.29±0.03和0.08±0.10;转染组细胞中TMPO mRNA和蛋白的表达水平均低于空白对照组和阴性对照组(均P<0.05). MTT检测结果显示,空白对照组、阴性对照组和转染组细胞在转染24 h时的吸光度( A)值分别为0.35±0.04、0.37±0.04和0.34±0.03,转染48 h时A值分别为0.47±0.06、0.46±0.08和0.37±0.04,转染72 h时A值分别为0.75±0.08、0.73±0.07和0.49±0.05,转染96 h时A值分别为1.09±0.07、1.06± 0.08和0.5

作者:董向阳;李文静;翟波

来源:中华肿瘤杂志 2019 年 41卷 10期

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作者:
董向阳;李文静;翟波
来源:
中华肿瘤杂志 2019 年 41卷 10期
标签:
肺肿瘤 TMPO基因 细胞增殖 细胞凋亡 Notch1/mTOR信号通路 Lung neoplasms Thymopoietin Cell proliferation Apoptosis Notch1/mTOR signaling pathway
目的 探讨小干扰RNA(siRNA)抑制胸腺生成素( TMPO)基因的表达对肺癌A549细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制.方法 采用脂质体转染法将TMPO siRNA转染至人肺癌A549细胞,将转染siRNA control作为阴性对照组.转染后48 h,采用实时荧光定量聚合酶链式反应( RT?PCR)和Western blot检测转染后细胞中TMPO的表达水平,四甲基偶氮唑蓝( MTT)法检测细胞的增殖情况,流式细胞术检测细胞周期和细胞的凋亡情况,Western blot检测细胞中PCNA、cleaved caspase?3、Notch1和mTOR的表达水平.结果 RT?PCR检测结果显示,空白对照组、阴性对照组和转染组细胞中TMPO mRNA的表达水平分别为1.01±0.11、0.99±0.10和0.36± 0.04. Western blot检测结果显示,空白对照组、阴性对照组和转染组细胞中TMPO蛋白的表达水平分别为0.27±0.02、0.29±0.03和0.08±0.10;转染组细胞中TMPO mRNA和蛋白的表达水平均低于空白对照组和阴性对照组(均P<0.05). MTT检测结果显示,空白对照组、阴性对照组和转染组细胞在转染24 h时的吸光度( A)值分别为0.35±0.04、0.37±0.04和0.34±0.03,转染48 h时A值分别为0.47±0.06、0.46±0.08和0.37±0.04,转染72 h时A值分别为0.75±0.08、0.73±0.07和0.49±0.05,转染96 h时A值分别为1.09±0.07、1.06± 0.08和0.5