目的观察氟对软骨细胞印度刺猬蛋白(Ihh)、甲状旁腺激素相关肽(PTHrp)、跨膜蛋白(Smo)表达和细胞增殖与凋亡的影响.方法原代培养乳鼠关节软骨细胞,传第3代后按染氟(氟化钠,NaF)剂量分为0(对照),5、10、20、40 mg/L染氟组.采用噻唑蓝(MTT)法测定24、48、72 h细胞增殖率;流式细胞术法检测24、48、72 h对照组和40 mg/L染氟组细胞凋亡情况;蛋白质免疫印迹法(Western blot)和反转录PCR(RT-PCR)法检测48 h Ihh、PTHrp、Smo蛋白及mRNA表达.结果与对照组比较,24、48、72 h 5 mg/L染氟组细胞增殖率明显升高,差异有统计学意义[(1.10±0.08)%比(1.17±0.07)%、(1.13±0.08)%比(1.20±0.06)%、(1.15±0.08)%比(1.16±0.08)%];40 mg/L染氟组细胞增殖率在48、72 h显著降低[(0.72±0.11)%、(0.68±0.04)%,P均<0.05].与对照组比较,40mg/L染氟组软骨细胞凋亡率在24、48、72 h逐渐增高[(1.47±0.05)%、(19.87±3.03)%、(25.30±1.28)%、(45.73±4.63)%,F=123.328,P< 0.01].与对照组比较,5、10、20、40 mg/L染氟组在48 h Ihh、PTHrp、Smo蛋白及mRNA表达均明显增高(Ihh蛋白:0.77±0.08比0.98±0.07、1.23±0.06、1.37±0.07、1.34±0.07;PTHrp蛋白:0.68±0.04比0.89±0.05、0.83±0.05、1.29±0.05、1.16±0.08
作者:陶欣;于燕妮;朱志坚;邓超男
来源:中华地方病学杂志 2016 年 35卷 2期