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目的:通过体外实验研究吲哚-3-甲醇(indole-3-carbinol,I3C)对人骨肉瘤(osteosarcoma,OS)细胞株MG63增殖与凋亡的影响并探讨其可能机制.方法:用不同浓度I3C作用于MG63细胞24 h后,在倒置显微镜下观察细胞形态学变化;CCK-8法检测不同浓度I3C对MG63细胞增殖活力的影响;用PI单染流式细胞术检测I3C对MG63细胞周期的影响情况;应用Annexin Ⅴ-FITC/PI双标记法检测I3C对MG63细胞凋亡的影响;蛋白免疫印迹法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和MAPK信号通路相关蛋白(p38/p-p38)表达水平.结果:与对照组比较,I3C作用后可使MG63细胞形态出现变圆、皱缩、细胞膜破裂,贴壁细胞减少,核碎裂,凋亡增多.CCK-8结果显示增殖活性受到抑制,且作用呈现浓度依赖性和时间依赖性.PI单染流式细胞术提示细胞周期呈现G2/M期阻滞;Annexin Ⅴ-FITC/PI双染提示I3C导致MG63细胞凋亡.Westernblot结果显示,随I3C浓度增加,抗凋亡蛋白Bcl-2和p38/p-p38表达下降,而促凋亡蛋白Bax表达上升.结论:I3C对MG63细胞增殖活性有抑制的影响和对细胞凋亡存在促进作用,此现象可能通过下调MAPK信号转导通路中的关键蛋白p-p38的表达水平,改变MG63细胞生长活动.

作者:郑锦畅;王朝军;陈辉文;孔俊超;高翔;荆凯鹏;彭丽娇;孙欣;林颢;彭智恒;魏波

来源:现代肿瘤医学 2017 年 25卷 24期

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作者:
郑锦畅;王朝军;陈辉文;孔俊超;高翔;荆凯鹏;彭丽娇;孙欣;林颢;彭智恒;魏波
来源:
现代肿瘤医学 2017 年 25卷 24期
标签:
骨肉瘤 MG63细胞 I3C MAPK信号通路 细胞增殖 细胞凋亡 osteosarcoma MG63 cells I3C MAPK signaling pathway cell proliferation cell apoptosis
目的:通过体外实验研究吲哚-3-甲醇(indole-3-carbinol,I3C)对人骨肉瘤(osteosarcoma,OS)细胞株MG63增殖与凋亡的影响并探讨其可能机制.方法:用不同浓度I3C作用于MG63细胞24 h后,在倒置显微镜下观察细胞形态学变化;CCK-8法检测不同浓度I3C对MG63细胞增殖活力的影响;用PI单染流式细胞术检测I3C对MG63细胞周期的影响情况;应用Annexin Ⅴ-FITC/PI双标记法检测I3C对MG63细胞凋亡的影响;蛋白免疫印迹法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和MAPK信号通路相关蛋白(p38/p-p38)表达水平.结果:与对照组比较,I3C作用后可使MG63细胞形态出现变圆、皱缩、细胞膜破裂,贴壁细胞减少,核碎裂,凋亡增多.CCK-8结果显示增殖活性受到抑制,且作用呈现浓度依赖性和时间依赖性.PI单染流式细胞术提示细胞周期呈现G2/M期阻滞;Annexin Ⅴ-FITC/PI双染提示I3C导致MG63细胞凋亡.Westernblot结果显示,随I3C浓度增加,抗凋亡蛋白Bcl-2和p38/p-p38表达下降,而促凋亡蛋白Bax表达上升.结论:I3C对MG63细胞增殖活性有抑制的影响和对细胞凋亡存在促进作用,此现象可能通过下调MAPK信号转导通路中的关键蛋白p-p38的表达水平,改变MG63细胞生长活动.