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目的 构建结核分枝杆菌CFP10-ESAT-6-CFP21(CE21)融合蛋白的重组质粒,通过IFN-γ的检测探讨CE21在结核病检测中的价值.方法 通过聚合酶链式反应(PCR)扩增获得CFP21和CFP10-ESAT-6(CE)基因片段,分别连接到pMD18-T,并将两片段2次连接到表达载体pET21a(+)中,获得pET21a-CFP10-ESAT-6-CFP21重组质粒;经表达纯化和复性后,去除内毒素,利用酶联免疫吸附试验检测48例结核病患者、30例非结核肺部疾病患者及32例健康对照者全血中IFN-γ的释放量.结果 CE21经SDS-PAGE分析后相对分子质量为45,与预期大小一致.CE21融合蛋白全血标本IFN-γ的检测,结核组阳性率为72.9

作者:周舟;丁元生;刘忠华;毛翎;桂徐蔚;胡忠义

来源:中国防痨杂志 2010 年 32卷 4期

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作者:
周舟;丁元生;刘忠华;毛翎;桂徐蔚;胡忠义
来源:
中国防痨杂志 2010 年 32卷 4期
标签:
分枝杆菌,结核 重组融合蛋白质类 抗原,细菌 干扰素Ⅱ型
目的 构建结核分枝杆菌CFP10-ESAT-6-CFP21(CE21)融合蛋白的重组质粒,通过IFN-γ的检测探讨CE21在结核病检测中的价值.方法 通过聚合酶链式反应(PCR)扩增获得CFP21和CFP10-ESAT-6(CE)基因片段,分别连接到pMD18-T,并将两片段2次连接到表达载体pET21a(+)中,获得pET21a-CFP10-ESAT-6-CFP21重组质粒;经表达纯化和复性后,去除内毒素,利用酶联免疫吸附试验检测48例结核病患者、30例非结核肺部疾病患者及32例健康对照者全血中IFN-γ的释放量.结果 CE21经SDS-PAGE分析后相对分子质量为45,与预期大小一致.CE21融合蛋白全血标本IFN-γ的检测,结核组阳性率为72.9