目的:人乳头瘤病毒16型(HPV16)疫苗的研制可望防治宫颈癌的发生、发展,本实验从中国感染人群中克隆L1基因,期望制备中国人群的HPV16的预防性疫苗.方法: 从HPV16阳性的尖锐湿疣临床标本中,PCR扩增HPV16 L1基因,克隆、测序,并在原核细胞表达L1蛋白,纯化蛋白经过复性后,电镜观察病毒样颗粒(VLP),VLP免疫动物观察抗体产生情况.结果:克隆的HPV16 L1, 测序结果发现有4个特异性突变位点是nt6240的C-G、nt6432 A→G、nt6901～03及nt6951～53.将HPV 16 L1基因克隆到原核表达载体pET-28a(+),高表达的蛋白应用蛋白转印证实是HPV16 L1蛋白,纯化的蛋白复性后可以自组装VLP,免疫动物产生高滴度的抗体.结论:从临床标本克隆表达了HPV16 L1基因,可以在原核细胞高表达及体外组装VLP,并且具有良好的免疫原性.为研制HPV16 预防性疫苗探索一条易于推广而经济的制备途径.
作者：刘朝奇；许雪梅；徐建青；李昆；司静懿；刘世德
来源：中国妇幼保健 2007 年 22卷 35期
