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目的:从感染人乳头瘤病毒(HPV)的新鲜宫颈癌组织中扩增HPV16型晚期蛋白L1基因全长,构建原核表达载体,表达并纯化蛋白用于ELISA检测.方法:根据基因序列设计一对特异引物,用PCR的方法从宫颈癌组织DNA中获得L1基因,以pet28a为载体构建表达质粒,IPTG诱导表达蛋白,DEAE及葡聚糖凝胶分离纯化目的蛋白,将蛋白包被平底96孔板用于ELISA检测.结果:从宫颈癌临床标本克隆到HPV16型L1蛋白编码序列,其原核表达产物纯化后可用于ELISA检测.结论:成功获得人有抗原性的HPV16 L1蛋白,可用于ELISA检测.

作者:赵丽晶;王学林;许多;梁作文;郭恒;孙树民;赵淑华;赵雪俭;郑晶莹

来源:中国妇幼保健 2010 年 25卷 3期

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作者:
赵丽晶;王学林;许多;梁作文;郭恒;孙树民;赵淑华;赵雪俭;郑晶莹
来源:
中国妇幼保健 2010 年 25卷 3期
标签:
HPV16 L1蛋白 原核表达 ELISA检测
目的:从感染人乳头瘤病毒(HPV)的新鲜宫颈癌组织中扩增HPV16型晚期蛋白L1基因全长,构建原核表达载体,表达并纯化蛋白用于ELISA检测.方法:根据基因序列设计一对特异引物,用PCR的方法从宫颈癌组织DNA中获得L1基因,以pet28a为载体构建表达质粒,IPTG诱导表达蛋白,DEAE及葡聚糖凝胶分离纯化目的蛋白,将蛋白包被平底96孔板用于ELISA检测.结果:从宫颈癌临床标本克隆到HPV16型L1蛋白编码序列,其原核表达产物纯化后可用于ELISA检测.结论:成功获得人有抗原性的HPV16 L1蛋白,可用于ELISA检测.