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目的:探讨采用无血清培养基(Ker-SFM)原代培养成人宫颈上皮细胞的效果和影响因素.方法:取65例因子宫良性病变切除子宫患者的宫颈组织,采用diapaseⅡ和胰蛋白酶-EDTA消化法获得宫颈上皮细胞悬液,于上皮细胞专用Ker-SFM中培养,采用免疫细胞化学法测定细胞中E-钙黏蛋白(E-cadherin)及波形蛋白(vimentin)的表达,对细胞纯度进行鉴定,并用透射电镜及扫描电镜观察细胞形态.结果:培养成功率69.23% (45/65),原代培养12 ~15天细胞生长达80%以上,早期细胞生长状态良好,传代至3代,细胞出现生长衰退.细胞鉴定E-cadherin阳性,vimentin染色阴性,电镜观察细胞符合上皮细胞特点.影响培养成功率的因素主要包括患者年龄大小、取材处组织有无损伤、子宫离体时间、术前是否有阴道或宫颈炎症以及培养基的选择.结论:采用酶消化法及Ker-SFM培养可获得纯度较高的成人宫颈上皮细胞,可作为宫颈癌基础研究的实验模型.

作者:江静;邓齐;马营营;赵昕;刘淳

来源:中国妇幼保健 2014 年 29卷 10期

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作者:
江静;邓齐;马营营;赵昕;刘淳
来源:
中国妇幼保健 2014 年 29卷 10期
标签:
原代培养 宫颈上皮细胞 无血清培养基 Primary culture Cervical epithelial cell Serum-free medium
目的:探讨采用无血清培养基(Ker-SFM)原代培养成人宫颈上皮细胞的效果和影响因素.方法:取65例因子宫良性病变切除子宫患者的宫颈组织,采用diapaseⅡ和胰蛋白酶-EDTA消化法获得宫颈上皮细胞悬液,于上皮细胞专用Ker-SFM中培养,采用免疫细胞化学法测定细胞中E-钙黏蛋白(E-cadherin)及波形蛋白(vimentin)的表达,对细胞纯度进行鉴定,并用透射电镜及扫描电镜观察细胞形态.结果:培养成功率69.23% (45/65),原代培养12 ~15天细胞生长达80%以上,早期细胞生长状态良好,传代至3代,细胞出现生长衰退.细胞鉴定E-cadherin阳性,vimentin染色阴性,电镜观察细胞符合上皮细胞特点.影响培养成功率的因素主要包括患者年龄大小、取材处组织有无损伤、子宫离体时间、术前是否有阴道或宫颈炎症以及培养基的选择.结论:采用酶消化法及Ker-SFM培养可获得纯度较高的成人宫颈上皮细胞,可作为宫颈癌基础研究的实验模型.