目的 获得人β-防御素-2(humanβ-defensin-2,hBD2)基因并构建其真核表达载体,转染小鼠纤维母细胞(L929),检测其表达,观察hBD2的体外抗菌活性.方法 采用逆转录(RT)-PCR方法从人宫颈癌组织获取人β-防御素-2基因,然后进行克隆扩增,重组真核表达载体pCAGG-hBD2,通过磷酸钙共沉淀法将pCAGG-hBD2导入L929细胞,并用RT-PCR法检测hBD2的表达,用Kirby-Bauer纸片扩散法检测其抗菌活性.结果 RT-PCR凝胶电泳及测序分析的结果显示,所克隆的hBD2基因序列正确,并成功构建了真核表达载体pCAGG-hBD2.Kirby-Bauer纸片法显示,hBD2对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌有明显的杀灭效应.结论 转染pCAGG-hBD2的L929细胞能高效表达hBD2,其对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌有杀灭作用.
作者：李娟；唐羚珊；刘娟；李斌；陈新年
来源：中国公共卫生 2007 年 23卷 9期
