目的 克隆人死亡受体5(DR5)cDNA的胞外区域(eDR5),构建原核重组表达载体pGEX-eDR5,使eDR5在大肠埃希菌中表达.方法 采用RT-PCR(反转录PCR)方法从人肝癌细胞HepG2中获得eDR5,然后克隆到pMD19.T载体上进行测序,得到正确的基因片段.经双酶切将目的 基因片段插入到原核表达载体pGEX-4T-1上,测序正确后,转入大肠埃希菌BL21(DE3)中用IPTG诱导表达GST-eDR5融合蛋白,最后用十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测目的 蛋白的表达量.结果 重组克隆载体pMD-eDR5经测序鉴定序列正确.构建的融合表达载体pGEX-eDR5在大肠埃希菌中表达,可溶性目的 蛋白占细菌总蛋白约19
作者：邢万金；包晓红
来源：中国公共卫生 2008 年 24卷 6期
