目的 优化家蝇抗真菌肽(MAF-1)原核表达条件及重组蛋白的活性验证.方法 利用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Quantity One凝胶电泳图像分析系统研究不同的诱导温度、异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导浓度和诱导时间对融合蛋白表达的影响;融合蛋白用镍离子金属螯合剂亲和层析柱进行蛋白纯化,切除His标签后进行活性验证.结果 在加入浓度为25 μmol/L的IPTG,34℃诱导18h,融合蛋白的表达量最高;融合蛋白纯化后浓度为0.706 mg/mL,其最低抑杀白色念珠菌的浓度为70 μg/mL.结论 成功获得重组融合蛋白的最佳表达条件,并纯化目的蛋白,切除His标签后的目的蛋白具有抗真菌活性.
作者：彭传林；魏川川；吴建伟；王宇；修江帆；罗振华
来源：中国公共卫生 2015 年 31卷 11期
