目的探讨丙型肝炎病毒(HCV)core、NS3、NS5A对内源性IFN-β表达的影响及其调控机制.方法将HCV core、NS3、NS5A表达载体pcDNA3.1/myc-His-core/NS3/NS5A转染至HepG2细胞,验证蛋白表达之后,采用实时荧光定量PCR和Western blot及ELISA方法观察3种蛋白对IFN-βmRNA及蛋白水平表达的影响.构建IFN-β全长启动子报告基因表达载体,借助双萤虫素酶活性检测,探讨HCV core、NS3、NS5A对IFN-β转录水平的调控机制.结果 pcDNA3.1/myc-His-core/NS3/NS5A在HepG2细胞中成功表达,与转染pcDNA3.1/myc-His空载体相比,pcDNA3.1/myc-His-NS3/NS5A过表达时,在mRNA及蛋白水平均能抑制HepG2细胞内IFN-β的表达,与转染空载体的对照组相比,差异有统计学意义(P <0.05).双萤虫素酶活性检测显示,转染IFN-β全长启动子报告基因表达质粒后,与对照组相比,双萤虫素酶活性降低,差异有统计学意义(P<0.05).pcDNA3.1/myc-His-core过表达时对IFN-β的表达无明显影响.结论HCV NS3/NS5A在mRNA及蛋白水平能抑制IFN-β表达,并通过其转录水平影响IFN-β表达, core对IFN-β的表达无明显影响.其具体调控机制有待进一步研究.
作者：董金玲；高萍；刘顺爱；王琦；张锦前；成军
来源：中国肝脏病杂志(电子版) 2013 年 1期
