目的 分析HPV18E2蛋白的CTL表位,合成并纯化这些表位多肽,构建表达HPV18E2蛋白的靶细胞,检验特异性CTL对靶细胞的杀伤效果,为进一步研制人乳头瘤病毒18型(HPV18)基因工程疫苗打下基础.方法 以重组质粒(pBR322-HPV18)为模板,利用PCR方法扩增HPV18E2 DNA片段,将HPV18E2 DNA与加强绿色荧光质粒(pIRES2-EGFP)重组构建重组质粒(pIRES2-HPV18E2-EGFP).用酶切电泳及测序检查质粒重组后序列正确性.重组质粒转染Hela细胞.51Cr释放实验评估CTL杀伤能力.结果 克隆重组质粒pIRES2-HPV18E2-EGFP酶切后显示的酶切图谱与预期相同,而且测序验证插入片段全序列无改变.转染并用G418筛选后,在荧光显微镜下可见绿色荧光细胞的表达.三条候选多肽特异性杀伤能力分别为60.00
作者：汪云；肖岚；吕凤林
来源：局解手术学杂志 2007 年 16卷 6期
